己酮可可堿聯(lián)合生育酚減少大鼠放射性心臟損傷的實驗研究.pdf

1、第一部分大鼠心臟照射后TGF-β1 mRNA表達水平及組織學(xué)改變的實驗研究研究。 目的:探討大鼠受照后心臟轉(zhuǎn)化生長因子β1(transfoming growth factorβ1，TGF-β1)mRNA水平隨時間的變化，并通過組織學(xué)檢查了解TGF-β1水平變化與放射性心臟損傷發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，為進一步抗纖維化藥物治療放射性心臟損傷的實驗研究提供參考。 資料與方法 60只大鼠隨機分為2組，對照組不接受照射，受照組

2、大鼠給予心臟照射20Gy，分別在受照后第1天、第2、4、8、12、24周各解剖5只對照組和5只受照組大鼠，分別檢測血清肌鈣蛋白和CK-MB水平變化，定量PCR檢測心臟組織TGF-β1 mRNA表達。心臟標(biāo)本切片以Masson染色，每個標(biāo)本隨機選取3張切片，每張切片隨機選取7個視野，置于Leica Q 500MC顯微圖像分析系統(tǒng)下，以40倍放大觀察，計算各切片中膠原纖維占視野總面積的百分比。 結(jié)果: 1、照射后24小時實驗

3、組血清肌鈣蛋白即有升高，2周時達到高峰(0.73±0.11ng/ml)，與對照組(0.11±0.04ng/ml)相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，實驗組CK-MB無明顯變化，兩組相比差異無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)； 2、心臟TGF-β1 mRNA表達在照射后第1天即出現(xiàn)升高，并在第2、12周出現(xiàn)高峰(受照組為8.55±1.19以及4.63±0.41×e<'-8>μg/ml，對照組為1.27±0.11以及1.35±0.15

4、×e<'-8>μg/ml)，兩組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)； 3、心臟受照后自第2周起纖維細胞比例增加(受照組為2.87±0.37﹪，對照組為1.14±0.55﹪)，隨時間延長放射性損傷逐漸加重，兩組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；心臟組織纖維化程度的變化與TGF-β1 mRNA表達水平的變化有顯著的正相關(guān)性(P=0.009). 結(jié)論: 1. TGF-β1參與心臟纖維化形成的全過程。 2

5、.將體視學(xué)定量與光鏡檢查相結(jié)合能更好判斷心臟組織放射性損傷的狀況。 3.在TGF-β1分泌高峰期使用抗纖維化藥物對其水平進行抑制，有可能對組織纖維化形成產(chǎn)生預(yù)防作用。 第二部分注射己酮可可堿和生育酚后受照大鼠心臟TGF-β1 mRNA表達水平及組織學(xué)改變的實驗研究。 研究目的: PTX和Vit.E作為抗氧化劑在皮膚放射性損傷的治療中取得理想效果，而目前由于多學(xué)科綜合治療在胸部腫瘤治療中的廣泛的應(yīng)用，毒副

6、反應(yīng)也相應(yīng)增加。放射性心臟損傷在治療后長期生存的患者中逐漸成為影響生存率的重要因素。本實驗通過在接受大劑量心臟照射的大鼠中聯(lián)合使用PTX和Vit.E，觀察這一聯(lián)合方案觀察聯(lián)合采用PTX和Vit.E時是否可下調(diào)心臟組織TGF-β1mRNA表達以及逆轉(zhuǎn)纖維化形成；進一步探索給藥時間是否會影響抗纖維化治療的效果；在照射過程中給藥是否可以預(yù)防遠期纖維化的發(fā)生。 資料與方法: 90只大鼠隨機分為3組，其中l(wèi)組為對照組，接受心臟照射

7、(20Gy)以及腹腔注射等量生理鹽水：第2組為實驗1組，大鼠接受心臟照射(20Gy)并自受照前3天起給予每天一次PTX 10mg/kg+Vit.E 15mg/Kg腹腔注射，直至受照后12周停止注射；第3組為實驗2組，大鼠自受照前3天起給予每天一次PTX 10mg/kg+Vit.E 15mg/kg腹腔注射直至受照后24周停止注射。分別在受照后第1天、第2、4、8、12、24周每組各解剖5只大鼠，定量PCR檢測心臟組織TGF-β1 mRNA

8、表達。每個心臟隨機切取3張切片，以Masson染色，切片置于Leica O 500MC顯微圖像分析系統(tǒng)下，以40倍放大觀察，計算各切片中膠原纖維占視野總面積的百分比。 結(jié)果: 1.對照組TGF-β1 mRNA在受照后第2、12周可達到高峰，實驗1組在第12周前TGF--β1 mRNA表達都處于較低水平，至24周時則出現(xiàn)升高，但仍略低于對照組。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析兩組實驗數(shù)據(jù)有顯著性差異(P<0.05)。 2.對照組大

9、鼠受照后第4至8周達到高峰，實驗1組在第12周前都處于較低水平，至24周時則出現(xiàn)升高。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析兩組實驗數(shù)兩組數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析存在顯著性差異(P<0.05)。 3.在照射后第1天至第12周，兩組大鼠心臟組織TGF-β1 mRNA表達水平變化及纖維化程度變化無明顯差別，第24周時持續(xù)用藥的實驗2組TGF-β1 mRNA表達水平及纖維化程度仍保持在較低水平，至12周停止用藥的實驗1組mRNA表達以及纖維化程度均較實驗2組明顯上升。