一次力竭性離心運(yùn)動及恢復(fù)期間大鼠骨骼肌超微結(jié)構(gòu)及機(jī)械生長因子(MGF)的變化.pdf

1、目的:
　　 研究一次力竭性離心運(yùn)動及恢復(fù)期間大鼠骨骼肌超微結(jié)構(gòu)以及機(jī)械生長因子MGF的變化情況。
　　 方法:
　　 實驗一:本研究以24只7周左右的健康雄性SD大鼠為研究對象，并隨機(jī)分為安靜對照組(Control);力竭運(yùn)動即刻組(E0);力竭運(yùn)動后24h組(E24);力竭運(yùn)動后48h組(E48)共四組，每組各6只。各力竭運(yùn)動組進(jìn)行一次性力竭（下坡跑）運(yùn)動，在力竭運(yùn)動后的不同時間點宰殺取樣。所有大鼠用烏拉坦腹

2、腔麻醉、宰殺后迅速取股外側(cè)肌、股直肌各一分為二。其中一部分用2.5％戊二醛固定，用于制作電鏡超薄切片，在透射電子顯微鏡下觀察骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的變化情況，另一部分保存于液氮中冷凍，用于檢測大鼠股外側(cè)肌中機(jī)械生長因子MGF的情況。
　　 實驗二:選用4只7周齡成年大鼠和1只新生大鼠，其中成年鼠分組為:安靜對照組1只，鈍挫傷即刻組1只，鈍挫傷24h組1只，鈍挫傷48h組1只。采用急性鈍挫傷模型，分別于鈍挫傷后不同時間點宰殺，迅速取股外側(cè)

3、肌并進(jìn)行即刻培養(yǎng)。采用倒置相差顯微鏡隨時跟拍每天衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)情況。
　　 結(jié)果:
　　 (1)成年大鼠經(jīng)過一次性力竭離心運(yùn)動之后，電鏡下觀察其股直肌的超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，安靜對照組大鼠骨骼肌的超微結(jié)構(gòu)正常。在一次性力竭運(yùn)動后即刻E0組出現(xiàn)了炎性細(xì)胞，間質(zhì)血管的改變，而力竭運(yùn)動24小時后即E24組可見骨骼肌細(xì)胞、線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)均出現(xiàn)扭曲、腫脹等形態(tài)改變，Z線、M線明顯異常，嵴紊亂等組織學(xué)變化情況。
　　 (2)本研究采用

4、酶聯(lián)免疫吸附法即ELISA檢測大鼠血清和骨骼肌中MGF的結(jié)果顯示，一方面，從血清中MGF的變化情況來看，力竭運(yùn)動組E0、E24、E48與安靜對照組相比呈升高趨勢，具有非常顯著性差異(P＜0.01)。另一方面，從骨骼肌中的MGF的變化來看，E0、E24、E48與安靜對照組相比，都有升高趨勢，其中E24組與安靜對照組相比具有非常顯著性的差異(P＜0.01)。
　　 (3)在安靜對照組中發(fā)現(xiàn)骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞最初呈圓形，多懸浮于培養(yǎng)液中，

5、1天后細(xì)胞逐漸貼壁生長，細(xì)胞較小，分布均勻，多呈圓形，此后細(xì)胞體積逐漸長大，開始分裂，鏡下可以看見3-5個或多個細(xì)胞成串排列。新生鼠的肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)中，與成年大鼠比較，肌衛(wèi)星細(xì)胞的數(shù)目較多。肌衛(wèi)星細(xì)胞貼壁培養(yǎng)48小時后開始增殖，肌肉衛(wèi)星細(xì)胞在第5-8天增殖較快，之后增殖減慢。
　　 結(jié)論:
　　 (1)一次性力竭運(yùn)動后大鼠骨骼肌超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)顯著性的組織學(xué)變化，例如肌原纖維排列混亂，結(jié)構(gòu)破壞，M線、Z線不夠清晰，甚至相鄰

6、間斷裂， H帶、 I帶界限模糊，細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)線粒體均發(fā)生形變，細(xì)胞間質(zhì)水腫明顯等現(xiàn)象。
　　 (2)一次性力竭運(yùn)動及恢復(fù)期間，與安靜對照組相比，大鼠血清和骨骼肌中機(jī)械生長因子(MGF)在力竭后即刻，24小時和48小時呈現(xiàn)增高的趨勢，且在24小時后達(dá)到峰值，提示MGF可能加快骨骼肌組織和血管再生修復(fù)。
　　 (3)大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外培養(yǎng)需要較高的條件要求，鈍挫傷后骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖能力比安靜對照組的增殖能力要強(qiáng)。并且新