可生物降解生長激素緩釋微球的研究.pdf

1、該文選用可生物降解的乳酸羥基乙酸共聚物(PLGA),將rhGH制成長效注射微球,考察微球在體內(nèi)外的緩釋效果,并探討rhGH-PLGA微球的降解特性和其中包裹的rhGH的穩(wěn)定性.采用復(fù)乳-溶媒蒸發(fā)法制備rhGH-PLGA微球,制得的微球表面光滑致密、球形圓整.建立了一種簡便、準確的rhGH-PLGA微球含量測定方法,該方法無需經(jīng)過數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換,利用紫外分光光度法即可直接進行檢測.采用均勻設(shè)計優(yōu)化并最終確定了rhGH-PLGA微球的處方和制備工

2、藝,優(yōu)化后的微球平均粒徑約為30μm,且具有較窄的粒徑分布和較高的包封率(>95﹪).通過二甲基喹啉(BCA)分析法測定微球在體外實驗中釋放的蛋白含量,考察穩(wěn)定劑和干燥工藝對rhGH-PLGA微球體外釋藥行為的影響,以評價微球的處方和制備工藝.結(jié)果表明,不同處方的rhGH-PLGA微球都具有明顯的緩釋效果,且釋藥時間長達30天.微球處方中的穩(wěn)定劑對其體外釋藥行為有較大影響,其中泊洛沙姆407(F127)對提高rhGH在微球制備過程中的穩(wěn)

3、定性作用較為突出,表現(xiàn)為含F(xiàn)127的微球累積釋放量增加.采用冷凍干燥法處理的微球,其釋藥量優(yōu)于真空干燥法.從不同角度探討了rhGH-PLGA微球的降解特性.對比釋放前后微球的電鏡照片,可見與釋放介質(zhì)接觸導(dǎo)致PLGA骨架發(fā)生本體溶蝕.微球釋放液的pH值隨著時間的延長而降低,為rhGH-PLGA降解并釋放出酸性降解產(chǎn)物提供了直接的證據(jù).利用差示掃描量熱法(DSC)測定空白微球降解前后的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度,進一步證實了微球中rhGH的持續(xù)釋放與P

4、LGA的溶蝕有關(guān).釋放介質(zhì)中加入十二烷基硫酸鈉(SDS)后藥物釋放量顯著增加,提示蛋白聚集并在聚合物表面發(fā)生非特異性吸附是導(dǎo)致rhGH釋放不完全的主要原因之一.微球中加入各種穩(wěn)定劑,尤其是非離子表面活性劑,對提高rhGH在微球制備過程中的穩(wěn)定性具有重要意義,而加入弱堿性無機鹽則能改善rhGH在釋放過程中的穩(wěn)定性.選擇大鼠作為實驗動物,皮下注射給予rhGH-PLGA微球,利用放射免疫吸附分析法(RIA)測定血藥濃度,考察了rhGH-PLG

5、A微球在動物體內(nèi)的藥物動力學(xué)行為.結(jié)果同樣證實,rhGH-PLGA微球具有明顯的緩釋作用,直到給藥后第30天時,動物體內(nèi)的rhGH濃度仍維持在正常生長激素水平之上,沒有呈現(xiàn)下降的趨勢.給予大鼠同等劑量rhGH溶液24小時后,其體內(nèi)的生長激素濃度即恢復(fù)至正常水平.該文最后運用高電壓靜電成囊技術(shù)制備了載有白蛋白的海藻酸鈣-殼聚糖微囊(BACM),全部制備過程在水相中完成,避免了有機溶媒對蛋白類藥物的破壞.制得的BACM球形圓整,初步體外釋放