人胰島素樣生長因子-1和RNA干擾多聚蛋白聚糖酶-1基因對人骨髓干細胞骨架的影響研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:目前慢病毒介導aggrecanase-1shRNA及hIGF-1雙向作用于類風濕患者骨髓間充質干細胞的研究還處在初級階段。
  目的:觀察在將aggrecanase-1shRNA、hIGF-1基因同時轉染到人骨髓間充質干細胞后,目的基因在細胞內的表達及細胞分化情況。
  方法:體外培養(yǎng)人骨髓間充質干細胞,并應用攜帶aggrecanase-1shRNA、hIGF-1基因和綠色熒光蛋白的慢病毒載體轉染第3代人骨髓間充質干細

2、胞,同時以空載體轉染人骨髓間充質干細胞作為陰性對照組。待病毒轉染率到最高時分別提取各組細胞的蛋白檢測從而得出目的基因表達量。并應用激光共聚焦顯微鏡觀察轉染成功后細胞的骨架及細胞形態(tài)。
  結果與結論:成功于體外培養(yǎng)出人骨髓間充質干細胞,而且以慢病毒為載體成功的將目的基因轉染到細胞內。熒光顯微鏡下可觀察到細胞發(fā)出綠色熒光,各組的平均轉染效率可達到88%。Western blot檢測結果及激光共聚焦顯微鏡下細胞形態(tài)顯示,目的基因在人骨

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