量子點免疫層析試紙條同步定量檢測血液傳染病三種指標的研究.pdf

1、乙型肝炎、丙型肝炎和艾滋病是三種常見的血液傳染病,嚴重威脅著人類健康,在臨床輸血和獻血過程中,國家衛(wèi)生部規(guī)定醫(yī)療和衛(wèi)生機構必須對這三種傳染病進行強制性檢測。目前,針對這三種血液傳染病的臨床診斷方法有很多,但各有缺點:如檢測靈敏度較低,且不能同步定量檢測;需要特殊檢測儀器,且檢測耗時較長等。針對這些檢測方法的不足之處,本研究將量子點(Quantum dot)技術和免疫層析技術相結合,研制一種量子點免疫層析試紙條,從而實現(xiàn)乙型肝炎、丙型肝炎

2、和艾滋病的同步定量檢測。
　　本文以EDC/NHS為反應活化劑,分別制備530nm CdSe/ZnS QD-抗HBsAg單抗、576nm CdSe/ZnS QD-HCV Ag和620nm CdSe/ZnS QD-HIV Ag偶聯(lián)物,并將三種量子點偶聯(lián)物噴涂于結合墊上,把抗HBsAg多抗、HCV Ag和HIV Ag包被于NC膜上作為檢測線,質控線包被羊抗鼠IgG,然后將樣品墊、結合墊、NC膜、吸水墊按順序組裝在PVC底板上,制備成量

3、子點免疫層析試紙條。通過熒光閱讀儀閱讀量子點試紙條的檢測帶和質控帶的熒光值,根據(jù)不同濃度的HBsAg、HCV抗體和HIV抗體的檢測帶(T)和質控帶(C)熒光值的不同,可以得出T/C的比值,此比值對應HBsAg、HCV抗體和HIV抗體濃度做標準曲線,即可實現(xiàn)乙型肝炎、丙型肝炎和艾滋病的同步定量檢測。
　　本課題研究結果:
　　(1)量子點免疫層析試紙條和膠體金試紙條以及ELISA法同時檢測臨床標本58份,其中HBsAg陽性38

4、份,陰性20份,用量子點試紙條和膠體金試紙條以及ELISA法分別檢測,比較結果顯示:量子點試紙條的符合率為98.1％,靈敏度為100％,特異性為95％,檢測下限濃度為2.6ng∕ml,檢測用時為10分鐘。相對ELISA法,大大節(jié)省了檢測時間,與金標法相比,靈敏度得到提高。
　　(2)量子點試紙條同步檢測HBsAg和HIVAb時,HBsAg陰性符合率為94.2％,HIVAb陰性符合率為89.6％;HBsAg陽性符合率為87.2％,H

5、IVAb陽性符合率為83.7％;HBsAg檢測靈敏度為95％,HIVAb檢測的靈敏度為90.1％;同步檢測HBsAg和HIVAb時,HBsAg和HIVAb的變異系數(shù)分別為12％和14.5％,均小于15％。
　　(3)量子點免疫層析試紙條同步定量檢測HBsAg、HCV Ab和HIV Ab探索實驗顯示:同步檢測HBsAg、HCV Ab和HIV Ab時,對這三種指標的定量檢測下限濃度分別為2.6 ng∕ml、15 ng∕ml和10 ng