稻水象甲腸道共生細菌的分離、轉(zhuǎn)化及定殖能力研究.pdf

1、共生細菌在昆蟲的生長發(fā)育、繁殖、抵抗病原菌和解毒有害物質(zhì)等生物學(xué)過程中起重要作用。稻水象甲（Lissorhoptrus oryzophilus Kuschel）在我國是一種重要的外來入侵害蟲，具有蔓延快、危害重、難防治的特點。此前有關(guān)稻水象甲體內(nèi)共生細菌的研究表明，其腸道細菌群落的多樣性較低，Pantoea和Wolbachia是主要種類。本研究基于體外培養(yǎng)和細菌16S rRNA序列的擴增和分析，對稻水象甲3個地理種群成蟲腸道中的細菌進行

2、了分離和鑒定，將pZeoDsRed質(zhì)粒轉(zhuǎn)入到細菌中，并初步研究了轉(zhuǎn)化株在稻水象甲成蟲腸道內(nèi)的定殖情況。結(jié)果如下:
　　對山西原平、云南尋甸和湖南湘鄉(xiāng)3個不同地理種群的稻水象甲的腸道細菌進行分離，鑒定出同屬于芽孢桿菌綱的兩種細菌即蠟樣芽胞桿菌Bacillus cereus和路德維希腸桿菌Enterobacter ludwigii。其中，B.cereus已被發(fā)現(xiàn)存在于多種昆蟲的腸道中，在稻水象甲中為首次分離到;E.ludwigii則至

3、今尚未在昆蟲中有過類似報道。
　　對分離到的B.cereus和E.ludwigii及此前分離到的稻水象甲另一種腸道細菌糞腸球菌Enterococcus faecalis進行了擬轉(zhuǎn)化，成功地將pZeoDsRed質(zhì)粒轉(zhuǎn)入這3種細菌中，獲得了具有抗氨芐青霉素和博萊霉素能力的重組細菌。此結(jié)果說明稻水象甲腸道中的一些細菌能被成功轉(zhuǎn)化，具有進一步研究的價值。
　　令稻水象甲成蟲分別取食經(jīng)上述3種細菌轉(zhuǎn)化株涂抹處理過的水稻葉片，觀察了轉(zhuǎn)化