篩選小麥內(nèi)生細(xì)菌防治小麥紋枯病.pdf

1、由禾谷絲核菌(Rhizoctonia cerealis)侵染小麥引起的小麥紋枯病(wheat sharp eyespot)是一種重要的土傳病害，在我國(guó)廣泛分布于黃淮冬麥區(qū)、西北春麥區(qū)和長(zhǎng)江中下游麥區(qū)，嚴(yán)重危害小麥的生產(chǎn)。目前，對(duì)于小麥紋枯病的防治尚缺乏有效的抗病品種，主要通過(guò)化學(xué)防治，不僅造成嚴(yán)重的環(huán)境污染，而且容易導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性，因此，尋找可以代替化學(xué)防治的安全有效的防治策略是小麥生產(chǎn)中亟待解決的重要課題。利用植物內(nèi)生細(xì)菌對(duì)病害

2、進(jìn)行生物防治，不僅可以克服化學(xué)防治的不足，更重要的因其能在小麥體內(nèi)定殖，生防效果穩(wěn)定而具有更重要的理論意義和應(yīng)用前景。本研究的主要目的是分離小麥內(nèi)生細(xì)菌，從中篩選出對(duì)小麥紋枯病有生防作用的菌株，分析菌株特性并進(jìn)一步篩選出有定殖能力的生防菌。 本研究首先從8種常用細(xì)菌培養(yǎng)基包括肉汁胨瓊脂、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、胰酶大豆瓊脂、馬鈴薯葡萄糖瓊脂、腦心浸液瓊脂、金氏培養(yǎng)基B、 LB營(yíng)養(yǎng)瓊脂和酵母膏蛋白胨瓊脂中選擇最佳小麥內(nèi)生細(xì)菌分離培養(yǎng)基，結(jié)果顯示

3、胰酶大豆瓊脂和金氏培養(yǎng)基B為分離小麥內(nèi)生細(xì)菌的適宜培養(yǎng)基。 采用表面消毒研磨分離的方法，從河南47份健康小麥品種根系內(nèi)獲得410株小麥內(nèi)生細(xì)菌，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同小麥品種中內(nèi)生細(xì)菌的數(shù)量和種類(lèi)存在差異，來(lái)源不同的同一小麥品種中內(nèi)生細(xì)菌的數(shù)量和種類(lèi)也存在差異。 從田間采集到的小麥紋枯病病株上分離到3株小麥紋枯病菌，經(jīng)顯微觀察菌絲分枝接近直角，細(xì)胞核染色鑒定細(xì)胞為雙核，符合紋枯菌Rhizoctonia cerealis Vand

4、er Hoeven的特點(diǎn)。通過(guò)對(duì)61份小麥品種致病性測(cè)試，比較了3株紋枯菌的致病能力，發(fā)現(xiàn)Ry-3菌株為高致病性菌株。61份小麥品種對(duì)其的平均病情指數(shù)為0.694.1，以Ry-3作為研究出發(fā)病原菌。 實(shí)驗(yàn)中確立了紋枯菌的最佳接種強(qiáng)度為1:30(v/v)，細(xì)菌以浸種和灌根方式接種，接種濃度為2×10<'9>cfu/mL，并以此建立了生防菌活體篩選體系，通過(guò)對(duì)410株內(nèi)生細(xì)菌初篩，有62株能降低發(fā)病率和病情指數(shù)，其中37株細(xì)菌具有明