銀翹散在不同煎煮時(shí)間下對(duì)致熱大鼠體溫及下丘腦cAMP含量的影響及其對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：銀翹散是我國(guó)清代著名溫病學(xué)家吳瑭創(chuàng)制的方劑，處方由金銀花、連翹、桔梗、薄荷、竹葉、生甘草、荊芥、淡豆豉、牛蒡子九味藥組成?！稖夭l辨》稱本方為“辛涼平劑”，以治療溫病以及某些雜病邪在衛(wèi)分、上焦而聞名，并一直沿用至今。吳瑭對(duì)本方的煎煮時(shí)間，服用方法等作了詳細(xì)的說(shuō)明，方后載“香氣大出，即取服，勿過(guò)煮。”此方法是取得療效的關(guān)鍵。目前臨床上有的忽視此煎法，結(jié)果取效不佳，反輕視該方的應(yīng)用，有的雖注意到此煎法，但究竟何謂“過(guò)煮”，“香氣大出”

2、究竟是多長(zhǎng)時(shí)間至今仍無(wú)定論，尚無(wú)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，我們?cè)陂L(zhǎng)期臨床實(shí)踐中通過(guò)對(duì)比觀察確定了煎煮時(shí)間，但尚未進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。本研究目的在于探討銀翹散“香氣大出，即取服”的最佳煎煮時(shí)間及其免疫調(diào)整作用，為更加準(zhǔn)確合理地應(yīng)用該方提供客觀而科學(xué)的依據(jù)，并進(jìn)一步擴(kuò)大其臨床應(yīng)用。 方法： 1、取雄性清潔級(jí)wistar大鼠96只，體重200-220克，隨機(jī)分為12組：空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，阿司匹林陽(yáng)性對(duì)照組，銀翹散煮沸后3分鐘高、中、低

3、濃度組，銀翹散煮沸后6分鐘高、中、低濃度組，銀翹散煮沸后12分鐘高、中、低濃度組。復(fù)制酵母所致大鼠發(fā)熱的模型：配制20％的干酵母懸液，對(duì)各組大鼠背部皮下注射，空白組皮下注射等量生理鹽水。造模后3小時(shí)30分灌胃給藥，模型組及空白組予等量蒸餾水，于造模后1、2、3、4、5、6、7小時(shí)各測(cè)體溫一次，之后斷頭處死，取下丘腦通過(guò)放射免疫法測(cè)定cAMP含量。數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)

4、的方差分析進(jìn)行比較，并進(jìn)行組間兩兩比較。 2、取雄性清潔級(jí)昆明小鼠88只，體重18-22克，隨機(jī)分為11組：空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，銀翹散煮沸后3分鐘高、中、低濃度組，銀翹散煮沸后6分鐘高、中、低濃度組，銀翹散煮沸后12分鐘高、中、低濃度組。各組采用環(huán)磷酰胺腹腔注射復(fù)制成免疫抑制模型，空白組予等量生理鹽水。自造模起開(kāi)始灌胃給藥，空白組及模型對(duì)照組予等量蒸餾水，連續(xù)7天。于末次給藥后30分進(jìn)行游泳耐力實(shí)驗(yàn)；通過(guò)尾靜脈注入墨汁法觀測(cè)

5、銀翹散對(duì)小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)對(duì)血流中惰性炭粒的吞噬廓清能力的影響；摘眼球處死小鼠測(cè)定銀翹散對(duì)其T細(xì)胞亞群的影響；各組稱重，取脾和胸腺計(jì)算脾指數(shù)、胸腺指數(shù)。數(shù)據(jù)處理同上。 結(jié)果： 1、銀翹散在不同煎煮時(shí)間下對(duì)致熱大鼠體溫及下丘腦cAMP含量的影響：空白組體溫在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)明顯變化，模型組體溫在6h時(shí)達(dá)高峰，明顯高于空白組，有顯著性差異(19＜0.05)；給藥后30分，阿司匹林明顯抑制大鼠體溫的升高，與模型組相比有顯著性差異(p

6、＜0.05)，其它各組與模型組相比無(wú)顯著性差異(p＞0.05)；給藥后1小時(shí)30分，銀翹散煮沸后3分鐘高濃度組、中濃度組，銀翹散煮沸后6分鐘高濃度組、中濃度組，阿司匹林組與模型組大鼠體溫相比，有顯著性差異(p＜0.05)，其它各組與模型組相比無(wú)顯著性差異(0＞0.05)；給藥后2小時(shí)30分，銀翹散各組和阿司匹林組與模型組大鼠體溫相比，均有顯著性差異(p＜0.05)，銀翹散煮沸后3分鐘高濃度組、中濃度組，銀翹散煮沸后6分鐘高濃度組、中濃度

7、組之間相互比較無(wú)顯著性差異(p＞0.05)，效果優(yōu)于銀翹散其它各組和阿司匹林組，有顯著性差異(p＜0.05)；給藥后3小時(shí)30分，銀翹散各組和阿司匹林組與模型組大鼠體溫相比，均有顯著性差異(p＜0.05)，銀翹散煮沸后3分鐘高濃度組、6分鐘高濃度組相互比較無(wú)顯著性差異(p＞0.05)，效果優(yōu)于銀翹散其它各組和阿司匹林組，有顯著性差異(p＜0.05)。造模后7小時(shí)，與正常對(duì)照組相比，模型組大鼠下丘腦組織中cAMP的含量明顯增高，有顯著性差

8、異(p＜0.05)。與模型組相比，銀翹散煮沸后3分鐘高、中濃度組，銀翹散煮沸后6分鐘高、中濃度組，阿司匹林組大鼠下丘腦組織中cAMP的含量明顯降低，有顯著性差異(p＜0.05)；其中以銀翹散煮沸后3分鐘高濃度組和6分鐘高濃度組效果為優(yōu)，與其它組相比有顯著性差異(p＜0.05)。銀翹散其余各組下丘腦組織中cAMP的含量雖有降低但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05)。 2、對(duì)免疫抑制小鼠游泳耐力時(shí)間的影響：銀翹散煮沸后3分鐘高濃度，3分鐘中

9、濃度，6分鐘高濃度可顯著提高免疫抑制小鼠的游泳耐力時(shí)間，與模型組相比差異有顯著性(p＜0.05)，3組比較無(wú)顯著性差異，銀翹散其它各組游泳耐力時(shí)間雖長(zhǎng)于模型組，但無(wú)顯著性差異。3分鐘高濃度和6分鐘高濃度組效果優(yōu)于12分鐘高、中、低濃度組，差異有顯著性(p＜0.05)。 3、對(duì)免疫抑制小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)對(duì)血流中惰性炭粒的吞噬廓清能力的影響：除銀翹散煮沸后6分鐘低濃度、12分鐘中、低濃度外，其余各組均能顯著增強(qiáng)免疫抑制小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)

10、的吞噬功能，K值和α值均見(jiàn)明顯增高，與模型組相比有顯著性差異(p＜0.05)。其中以銀翹散煮沸后3分鐘高濃度和6分鐘高濃度的效果為優(yōu)，兩者相比無(wú)顯著性差異(p＞0.05)，與銀翹散其它組相比差異有顯著性(p＜0.05)。 4、對(duì)免疫抑制小鼠外周血中T細(xì)胞亞群的影響：銀翹散可顯著提高各組小鼠外周血中CD4+T細(xì)胞的數(shù)量，與模型組相比有顯著性差異(p＜0.05)，銀翹散煮沸后3分鐘高濃度組效果優(yōu)于其它各組，且有顯著性差異。銀翹散各組

11、有升高小鼠外周血中CD8+T細(xì)胞數(shù)量的趨勢(shì)，但作用不顯著。另外，銀翹散煮沸后3分鐘高、中、低濃度可顯著提高小鼠外周血中CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的比值，與模型組相比有顯著性差異(p＜0.05)。 5、對(duì)免疫抑制小鼠脾臟、胸腺器官重量的影響：銀翹散煮沸后3分鐘高濃度組能顯著性地增加各組小鼠胸腺重量和脾臟重量，與模型組相比有顯著性差異(p＜0.05)，銀翹散其余各組小鼠胸腺和脾臟重量均有升高趨勢(shì)，但作用不顯著。 結(jié)論：

12、 1、銀翹散具有明顯的解熱效應(yīng)，其效果以煮沸后3分鐘、6分鐘為優(yōu)。 2、銀翹散可降低發(fā)熱大鼠下丘腦組織中cAMP的含量，提示其解熱作用機(jī)理之一可能是通過(guò)降低中樞發(fā)熱介質(zhì)含量而發(fā)揮其解熱作用。其效果以煮沸后3分鐘、6分鐘為優(yōu)。 3、銀翹散具有免疫增強(qiáng)作用，提高免疫抑制小鼠的游泳耐力時(shí)間以煮沸后3分鐘、6分鐘為優(yōu)；增強(qiáng)免疫抑制小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的吞噬功能以煮沸后3分鐘、6分鐘為優(yōu)； 提高免疫抑制小鼠外周