成纖維細胞與自體毛發(fā)角蛋白凝膠作為軟組織填充材料的實驗研究.pdf

1、目的：探索成纖維細胞與自體毛發(fā)角蛋白凝膠混合注射材料作為新型自體軟組織填充材料和蛋白修復系統(tǒng)的可行性，為臨床應用奠定實驗基礎。 方法：采用兔真皮成纖維細胞和兔毛角蛋白凝膠，取6～7周齡裸鼠12只，將兔真皮成纖維細胞與自體毛發(fā)角蛋白凝膠混合材料注射到裸鼠(無胸腺鼠)背部皮膚，制作動物皮膚軟組織填充實驗模型，每只動物背部左側(cè)各取2個注射點作為實驗組，對側(cè)相應部位各取2個注射點作為對照組。實驗組(FG組)：角蛋白凝膠與真皮成纖維細胞混

2、合組，含有5×10<'5>真皮成纖維細胞與200μl凝膠懸浮液；角蛋白凝膠對照組(G組)：含有200μl角蛋白凝膠；真皮成纖維細胞對照組(F組)：含有5×10<'5>真皮成纖維細胞。分別于注射體內(nèi)后第1，2，4，6，8，10，12周對注射區(qū)皮膚進行大體觀察，注射區(qū)皮膚組織切片HE染色觀察皮膚形態(tài)學改變及真皮厚度測量、抗兔I型膠原蛋白免疫組織化學染色及Western-blot對兔Ⅰ型膠原蛋白進行定量檢測。 結(jié)果：注射后不同時間點注

3、射區(qū)皮膚均無感染化膿及破潰；F組第1周后體積消失，F(xiàn)G組和G組注射區(qū)皮膚隆起體積隨時間延長逐漸減小，12周時FG組約為第1周的40％，G組皮膚隆起基本消失；相同時間段觀察真皮厚度示FG組>F組>G組；2周時FG組和F組Ⅰ型膠原蛋白抗體免疫組織化學染色呈強陽性，G組呈弱陽性，免疫組化圖像分析顯示FG組陽性密度大于F組；Western-blot抗兔Ⅰ型膠原蛋白定量檢測FG組>F組>G組；隨時間延長，F(xiàn)G組和F組Ⅰ型膠原蛋白蛋白含量明顯升高。