針刺防治糖尿病合并腦缺血導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙的機(jī)理研究.pdf

1、針刺防治糖尿病合并腦缺血導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙的機(jī)理研究研究背景與研究目的糖尿病(DM)是常見的內(nèi)分泌代謝性疾病,近年來其發(fā)病率呈急劇上升之勢.DM慢性并發(fā)癥可損害全身各系統(tǒng),其中DM神經(jīng)病變是使DM患者致殘的主要原因.對DM中樞神經(jīng)病變的臨床研究顯示,DM合并腦動脈硬化較非DM者高2-4倍,DM引起的血管病變使中風(fēng)的危險性增加4-5倍,而中風(fēng)的結(jié)果又使DM病情進(jìn)一步加重.DM可引起認(rèn)知功能的障礙;DM與血管性癡呆(VD)的關(guān)系較密切,DM患

2、者的VD發(fā)生率為33％;DM患者老年性癡呆的發(fā)病率是正常人的兩倍;與正常腦老化相比,DM引起的腦萎縮發(fā)病年齡提前.在中國,DM并發(fā)腦血管意外則更為常見.然而,目前對這一慢性并發(fā)癥的防治尚無滿意的療法.臨床研究表明,針刺可改善認(rèn)知障礙;針刺治療老年癡呆有一定效果.綜合149篇論文有關(guān)針灸治療1334例老年癡呆的統(tǒng)計表明,單純針刺治療的有效率為83.57％.動物實(shí)驗(yàn)研究顯示,電針、艾灸和穴位注射均能改善衰老小鼠的空間分辨能力;針刺"百會"穴

3、能改善大鼠被動逃避反應(yīng)障礙,改善記憶的存儲功能.近年來,針灸療法用于治療DM,尤其是對血管及神經(jīng)并發(fā)癥,以其療效確切、作用持久、副作用少而受到醫(yī)學(xué)界的普遍關(guān)注.該研究組的相關(guān)工作也顯示:針刺可減輕DM小鼠和大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的程度.以上研究均表明,針刺對DM引起的記憶障礙有較好的治療作用.但至今為止尚缺少從多水平、多層次上開展的深入的機(jī)理研究.因此,該研究在糖尿病合并腦缺血導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙模型上從整體、細(xì)胞及遞質(zhì)水平研究其病理改變及針刺對

4、其防治作用的機(jī)理,從而為闡明針刺防治DM記憶障礙的機(jī)理提供新的科學(xué)資料,為推廣針刺防治學(xué)習(xí)記憶障礙、提高針灸臨床療效提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).研究內(nèi)容 糖尿病合并腦缺血導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙模型的建立及針刺效應(yīng)采用行為學(xué)和H-E染色方法建立糖尿病合并腦缺血導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙的動物模型,同時觀察針刺的防治作用.材料和方法實(shí)驗(yàn)用健康雌性Wistar大鼠,體重150-200g.隨機(jī)將動物分為正常對照組(15只)和實(shí)驗(yàn)組(80只).禁食12小時后,實(shí)驗(yàn)組動物腹腔注

5、射2％鏈脲佐菌素(STZ)60mg/kg;正常對照組和腦缺血組動物注射等量的檸檬酸鈉緩沖液.1周后測定血糖,空腹血糖高于15.5mM定為DM模型.注射STZ三天后,在1％的戊巴比妥鈉(4ml/kg,i.p.)麻醉下,采取仰臥固定,頸正中切口,分離雙側(cè)頸總動脈,用動脈夾阻斷15分鐘后再灌注5分鐘.如此重復(fù)阻斷兩次.假手術(shù)組只進(jìn)行雙側(cè)頸總動脈的分離,不夾閉動脈.缺血再灌注術(shù)后10天和30天,確認(rèn)肢體無殘疾者進(jìn)行行為學(xué)測試.動物分為五組,分別

6、是正常對照組(Con,n=15),糖尿病+假手術(shù)組(DM+Sham,n=19),腦缺血組(CI,n=18),糖尿病+腦缺血組(DM+CI,n=18)即模型組,糖尿病+腦缺血組+針刺組(DM+CI+Acup,n=17)即針刺治療組.選穴原則為活血通絡(luò)、益氣補(bǔ)腎、安神醒腦.針刺穴位為"百會"、雙側(cè)"三陰交"、"脾俞"或"百會"、雙側(cè)"腎俞"、"足三里",兩組穴位交替進(jìn)行,手針治療,留針30分鐘,隔日一次.從手術(shù)后一周開始針刺,共治療30次,

7、療程60天.模型組也同樣進(jìn)行捆綁,但不針刺.腦缺血術(shù)后10天和30天,動物進(jìn)行行為學(xué)測定.采用跳臺測定動物的被動回避反應(yīng)、主動回避反應(yīng)能力,Morris水迷宮測定其空間記憶能力.行為學(xué)試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行常規(guī)灌注固定后,取出腦組織,hematoxylin-eosin(H-E)染色進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察.結(jié)論該研究首次采用STZ誘導(dǎo)糖尿病合并雙側(cè)頸總動脈缺血再灌注法,建立了糖尿病合并腦缺血再灌注導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙的一種新的改良的模型,觀察了針刺對由此