HIV-1衣殼前體蛋白性質(zhì)分析及表位初步研究.pdf

1、艾滋病是以人體免疫系統(tǒng)嚴(yán)重?fù)p害為特征的傳染性疾病,一旦感染,終生攜帶。其病原體為人類免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV),迄今對(duì)此病沒有有效治療手段,經(jīng)歷HIV潛伏期后,感染者終將死于感染或腫瘤。因此,對(duì)艾滋的預(yù)防、診斷以及對(duì)艾滋患者病情監(jiān)控尤為重要。在HIV感染后,人體內(nèi)的針對(duì)Gag蛋白的抗體水平都可以作為病情監(jiān)控的指標(biāo),編碼它們的Gag基因高度保守,因此對(duì)Gag生物學(xué)性質(zhì)分析以及表位研究對(duì)

2、于艾滋病的診斷和治療具有重要現(xiàn)實(shí)意義。
　　 本研究通過原核表達(dá)獲得HIV-1兩種亞型Gag的p41蛋白(基質(zhì)蛋白p17和衣殼蛋白p24部分),即C亞型M41和B亞型N41,其中C亞型p41為二聚體,同時(shí)本實(shí)驗(yàn)已有216株廣譜或特異的p24單抗;通過對(duì)HIV-1陽(yáng)性血清的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)p41能夠?qū)IV-1陽(yáng)性血清檢測(cè)效果更好;在和p24廣譜單抗相互作用時(shí),p41的反應(yīng)性強(qiáng)于p24,而這種增強(qiáng)作用與p24抗體表位位于p24的NTD或C

3、TD無(wú)關(guān),推斷p17對(duì)p24的結(jié)構(gòu)起到了一定的作用,對(duì)p24表位產(chǎn)生了影響;通過與p24特異單抗(P9A1)親和力測(cè)定發(fā)現(xiàn),p4l和抗體P9A1的親和力提升了近100倍。在對(duì)p41和p24采用不同方式免疫后進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)p41免疫原性顯著優(yōu)于p24。
　　 利用HBV core展示p17和p24之間的連接區(qū)域以及逐步截短p17的方法,發(fā)現(xiàn)連接區(qū)域的表位在檢測(cè)中貢獻(xiàn)不明顯,同時(shí)041在檢測(cè)中的作用隨著p17蛋白的變短而降低;通過對(duì)