中藥多糖組方的佐劑效應研究.pdf

1、目的：
　　通過正交設計將黃芪多糖（APS）、香菇多糖（LNT）和枸杞多糖（LBP）按不同的比例構成系列組方，通過對脾淋巴細胞增殖率、免疫臟器指數、體重增長率以及特異性抗體含量的檢測，優(yōu)選出一種具有較強免疫佐劑效應的中藥多糖組方。
　　方法：
　　1、中藥多糖的免疫佐劑組方篩選
　　將110只昆明小鼠隨機平均分為正常對照組、免疫抑制模型組和9個中藥多糖組方組（9組），采用灌胃的方式給予相應藥物，連續(xù)用藥14 d。

2、除正常對照組給予生理鹽水外，其余各組小鼠分別于第3、6、9d腹腔注射環(huán)磷酰胺。利用細胞培養(yǎng)技術檢測相應藥物作用后脾淋巴細胞的增殖情況，并結合其對小鼠免疫臟器指數和體重增長率的影響，篩選出一個免疫增強功能最強的最適中藥組方。
　　2、優(yōu)選多糖組方的免疫佐劑效應研究
　　將90只昆明小鼠隨機平均分為無佐劑組、鋁佐劑組、優(yōu)選配方組。免疫優(yōu)選配方組及無佐劑組小鼠分別通過腹部皮下注射OVA免疫小鼠；鋁佐劑組采用自制鋁佐劑，與OVA混合

3、后免疫小鼠。14天后進行二次免疫。兩次免疫前3天均連續(xù)灌胃優(yōu)選配方組小鼠優(yōu)選組方。通過酶聯(lián)免疫吸附技術（ELISA），檢測小鼠血清中OVA-IgG的含量，并結合免疫臟器指數，研究優(yōu)選多糖組方對OVA免疫小鼠后產生抗體的含量、持續(xù)時間及其對免疫臟器指數的影響。
　　結果：
　　1、大多數中藥多糖組方對免疫抑制小鼠具有免疫增強作用
　　組方1、2、5、7組脾 T細胞增殖指數較免疫抑制組顯著升高，分別增加96.30％、116

4、.3%、98.52%、94.81%。組方1、3、6、7、9組較正常組脾臟指數明顯升高，分別增加44.80%、75.27%、42.65%、52.69%、44.80%。組方6、7、8、9組較正常組小鼠胸腺指數無明顯差異，其余組方組均小于正常組。組3、4、5、7、8較CP組體重增長率明顯增加，分別增加40.1%、24.8%、26.0%、23.5%、19.4%。組1、2、9與正常組比較體重增長率顯著降低（P<0.05），除組3高于正常組外，其余

5、各組與正常組均無顯著差異（P>0.05）。經方差分析后比較得出，組7（即黃芪：香菇：枸杞多糖為3:1:3）可抵抗由環(huán)磷酰胺所引起的小鼠免疫抑制狀態(tài)，增強小鼠免疫功能，在所檢測的組方中最強。因此，后續(xù)研究以該組方為優(yōu)選的最佳比例組方進行試驗（稱做：優(yōu)選配方組）。
　　2、優(yōu)選配方組的免疫佐劑作用較為顯著
　　優(yōu)選配方組在二免后第2w時血清OVA-IgG含量出現(xiàn)明顯提升，顯著高于同時間點的無佐劑組（P<0.05）；在第3w時優(yōu)選

6、配方組含量均值有高于無佐劑組的趨勢。優(yōu)選配方組脾臟指數、胸腺指數均值在各時間點，均有高于無佐劑組趨勢（P>0.05）。說明優(yōu)選配方作為OVA抗原佐劑，可以提高和維持脾臟和胸腺的功能，可以促進血清OVA-IgG的產生，延長了抗體的持續(xù)期。
　　結論：
　　1、不同比例的黃芪、香菇、枸杞多糖合用可以不同程度地增強免疫低下機體的免疫功能；
　　2、優(yōu)選配方組能促進OVA免疫小鼠產生IgG，可延長抗體的持續(xù)期，且對脾臟、胸腺功