白介素-18在慢性阻塞性肺疾病發(fā)病機(jī)制中的作用研究.pdf

1、第一部分
　　白介素-18及其受體在慢性阻塞性肺疾病患者外周血中的表達(dá)研究
　　目的:慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)是一個(gè)復(fù)雜的全身性疾病,它的特點(diǎn)是既有肺的局部炎癥也有全身性炎癥。許多研究提示COPD患者出現(xiàn)血循環(huán)中的炎癥細(xì)胞活化和炎癥細(xì)胞因子水平增高。白介素-18(Interleukin-18, IL-18)是一種促炎細(xì)胞因子,主要通過與白介素-

2、18受體(Interleukin-18 Receptor, IL-18R)結(jié)合而發(fā)揮其作用。本文研究 COPD患者血清IL-18和外周血 T淋巴細(xì)胞表面 IL-18R的表達(dá)變化。
　　方法:收集 COPD病例、健康吸煙者以及健康非吸煙者,行肺功能檢查并采集外周血,用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)測(cè)定血清 IL-18和γ干擾素(Interferon-γ,IFN-γ)

3、,用化學(xué)發(fā)光免疫分析法測(cè)定血清中的超敏 C反應(yīng)蛋白(high sensitivity C-reactive protein,hsCRP)。用三色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血 T淋巴細(xì)胞表面 IL-18R的表達(dá)變化。
　　結(jié)果:本研究共納入120名受試者,其中COPD穩(wěn)定期患者58例,健康吸煙者30例以及健康非吸煙者32例。COPD患者血清中的IL-18和hsCRP水平顯著高于吸煙者和非吸煙者(P<0.05)。在穩(wěn)定期患者中,血清 IL-1

4、8水平與肺功能呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05),而hsCRP與肺功能并不存在這樣的關(guān)系。穩(wěn)定期患者外周血中表達(dá) IL-18R的T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞比例均顯著高于吸煙者和非吸煙者(P<0.05)。
　　結(jié)論:本研究結(jié)果提示穩(wěn)定期 COPD患者外周血中IL-18和IL-18R系統(tǒng)是處于活躍狀態(tài)的。
　　第二部分
　　白介素-18在被動(dòng)吸煙誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病大鼠中的表達(dá)研究
　　目的:研究白介素-18(Int

5、erleukin-18, IL-18)在被動(dòng)吸煙誘導(dǎo)的慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)大鼠中的表達(dá)變化。
　　方法:將20只大鼠隨機(jī)分為2組,正常對(duì)照組和COPD模型組。應(yīng)用單純被動(dòng)吸煙法建立大鼠COPD模型,香煙煙霧暴露時(shí)間為6個(gè)月。用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)測(cè)定2組大鼠血清和支氣管肺泡灌洗液(bronchoal veolar lavage flui

6、d, BALF)中的IL-18濃度,用實(shí)時(shí)定量 RT-PCR法測(cè)定 BALF中IL-18 mRNA的表達(dá)水平,用HE染色法觀察肺組織形態(tài)學(xué)改變,用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè) IL-18在肺組織中的表達(dá)。
　　結(jié)果:COPD模型組血清和BALF中的IL-18濃度較正常對(duì)照組顯著增加(P<0.01), COPD模型組 BALF中IL-18 mRNA的表達(dá)水平較正常對(duì)照組顯著增高(P<0.01), COPD模型組肺組織中IL-18的表達(dá)較正

7、常對(duì)照組顯著增加(P<0.01)。
　　結(jié)論:被動(dòng)吸煙誘導(dǎo)的COPD大鼠外周血和肺部均高表達(dá) IL-18,提示 IL-18在吸煙所致的COPD發(fā)病機(jī)制中可能起重要作用。
　　第三部分
　　白介素-18基因多態(tài)性與慢性阻塞性肺疾病的相關(guān)性研究
　　目的:慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一種復(fù)雜的與遺傳基因具有一定相關(guān)性的疾病,許多基因可能在此疾病的發(fā)病機(jī)制中起到重要作用。有文獻(xiàn)報(bào)道白介素-18基因啟動(dòng)子區(qū)的某些變異與

8、很多炎癥性疾病如支氣管哮喘等具有相關(guān)性。但是,白介素-18基因多態(tài)性與 COPD的相關(guān)性尚未見報(bào)道。本文通過前瞻性的病例對(duì)照研究來探索男性吸煙人群中白介素-18基因多態(tài)性與 COPD的相關(guān)性。
　　方法:我們總共納入了112例 COPD患者和年齡匹配的105例健康吸煙者,對(duì)所有受試者進(jìn)行肺功能測(cè)試,根據(jù) COPD患者肺功能氣流受限程度將其分成兩組,輕中度患者組和重度極重度患者組。用TaqMan單個(gè)核苷酸基因多態(tài)性基因分型法對(duì)所有受

9、試者白介素-18基因多態(tài)性(-607 C/A和-137 G/C)進(jìn)行基因分型,將 COPD患者的基因型和等位基因的頻率與健康吸煙者進(jìn)行比較,同時(shí)對(duì)重度極重度患者組的基因型和等位基因的頻率與輕中度患者組進(jìn)行比較。
　　結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn) COPD患者組白介素-18-607 C等位基因的頻率顯著高于健康吸煙者組(比值比(OR)=1.48,95％可信區(qū)間(CI)=1.01-2.15, P=0.04)。重度極重度患者組-607 C/C基因型頻

10、率顯著高于輕中度患者組(OR=4.31,95％ CI=1.39-13.4, P=0.01)。重度極重度患者組 C等位基因的頻率顯著高于輕中度患者組(OR=2.06,95％CI=1.21-3.51, P=0.01)。白介素-18-137 G/C基因型頻率和等位基因頻率分布在上述兩個(gè)比較中無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論:白介素-18-607 C/A基因多態(tài)性與 COPD的易感性及肺功能的氣流受限程度存在顯著相關(guān)性,而-137 G/C基因

11、多態(tài)性與 COPD并不存在這樣的相關(guān)性。
　　第四部分
　　噻托溴銨聯(lián)合福莫特羅與單用噻托溴銨治療慢性阻塞性肺疾病的有效性和安全性比較
　　目的:噻托溴銨和福莫特羅是兩種作用機(jī)制不同的長(zhǎng)效支氣管擴(kuò)張劑,主要用于治療慢性阻塞性肺疾病。但目前尚不清楚的是聯(lián)合使用這兩種藥物能否增強(qiáng)療效以及是否會(huì)產(chǎn)生更多的不良反應(yīng),我們通過薈萃分析來比較噻托溴銨聯(lián)合福莫特羅與單用噻托溴銨在治療慢性阻塞性肺疾病中的有效性和安全性。
　　方

12、法:使用COPD, tiotropium, formoterol和LABA等關(guān)鍵詞對(duì)MEDL工NE, EMBASE和C工NAHL等數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行文獻(xiàn)檢索，得到符合標(biāo)準(zhǔn)的隨機(jī)臨床試驗(yàn)文章，從中提取有用數(shù)據(jù)，對(duì)于連續(xù)變量使用加權(quán)平均差進(jìn)行分析，對(duì)于二分變量則使用比值比進(jìn)行分析，異質(zhì)性分析用工2統(tǒng)計(jì)量進(jìn)行分析，如果異質(zhì)性程度高則用隨機(jī)效應(yīng)模型，如果異質(zhì)性程度低則用固定效應(yīng)模型，發(fā)表偏倚使用Egger法進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:總共納入了8個(gè)隨機(jī)

13、臨床試驗(yàn)，隨機(jī)患者數(shù)為1868人。分析結(jié)果顯示聯(lián)合治療比單用曝托溟按治療平均FEV1增加105mL (95％CI:69-142, P<0.0001)，平均FVC增加135mL (95％CI:96-174, P<0.0001)。聯(lián)合治療比單用噻托溴銨治療呼吸困難轉(zhuǎn)化指數(shù)平均值提高了1.5個(gè)單位(95％CI:1.01-1.99, P<0.0001)，呼吸困難轉(zhuǎn)化指數(shù)改善值具有臨床意義的患者數(shù)明顯增加(OR 2.34, 95％CI:1.5

14、8-3.46, P<0.0001) 。聯(lián)合治療時(shí)不良事件的累積發(fā)生率為33.2％，而單用噻托溴銨時(shí)不良事件的累積發(fā)生
　　率為36％，具有減少的趨勢(shì)，但是分析結(jié)果也顯示兩者比較沒有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(OR0.88, 95％CI:0.70-1.11, P=0.28)。
　　結(jié)論:這個(gè)薈萃分析的結(jié)果提示，聯(lián)合治療比單用噻托溴銨治療更能改善慢性阻塞性肺疾病患者的肺功能和癥狀，對(duì)于不良事件的發(fā)生率而言，聯(lián)合治療并沒有增加其發(fā)生率反