中藥復(fù)方WZDL有效部位群及其抗腫瘤作用研究.pdf

1、“研制開發(fā)中藥復(fù)方有效部位群是中藥現(xiàn)代化的有效途徑，在闡明其藥效及作用機(jī)理的基礎(chǔ)上，進(jìn)行中藥及其復(fù)方開發(fā)的系列研究?！斑@是在“第三屆生物多樣性保護(hù)與利用高新科學(xué)技術(shù)國(guó)際研討會(huì)”上專家對(duì)中藥現(xiàn)代化研究提出的寶貴建議。復(fù)方經(jīng)提取、純化得到的有效部位，去除了大量無效及許多具有限制性、抑制性的成分，藥效作用突出，副作用減少；同時(shí)化學(xué)成分更加明確，有利于藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定和生產(chǎn)質(zhì)量的控制。 本課題選用由五味子、山茱萸、金櫻子、訶子、白及五

2、味藥組成的中藥復(fù)方WZDL作為研究對(duì)象，通過廣泛的文獻(xiàn)調(diào)研，建立了復(fù)方中各單味藥的數(shù)據(jù)庫(包括單味藥的來源、性狀、性味及歸經(jīng)、功能主治，已報(bào)道的化學(xué)成分、含量及其在體內(nèi)、體外的藥理活性研究)。通過對(duì)已報(bào)道文獻(xiàn)的整理、分析，結(jié)合對(duì)粗提物的初步定性實(shí)驗(yàn)，確定了四個(gè)有效部位即總木脂素、總皂苷、總多糖、總鞣質(zhì)。為了能更有效地提取、分離有效部位，根據(jù)各有效部位在單味藥中的存在特點(diǎn)，把復(fù)方中五味藥分成四組，分別進(jìn)行提取、分離、純化操作。即從五味子中

3、提取總木脂素，從山茱萸中提取總皂苷，從訶子和金櫻子中提取總鞣質(zhì)，從白及中提取白及多糖。 從總固形物得率、有效部位的含量、除雜實(shí)驗(yàn)、薄層鑒別等多個(gè)方面，研究比較了多種方法的分離、純化效果。篩選出大孔吸附樹脂HPD-300型對(duì)山茱萸皂苷純化效果較好，并通過柱色譜對(duì)得到的總皂苷進(jìn)一步分離得到2個(gè)有效部位(Ⅲ和Ⅴ)；在乙酸乙酯萃取部位得到總鞣質(zhì)(O)；通過索氏提取，硅膠柱色譜分離得到總木脂素(Ⅳ)；從白及中水提醇沉得到白及膠(Ⅰ)；對(duì)除

4、白及外其余四味中藥提取后的藥渣水提醇沉得到總多糖(Ⅱ)，并探討了大孔吸附樹脂除色素及sevag法除蛋白對(duì)多糖的純化作用。 對(duì)0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ部位及其配伍組成的復(fù)方進(jìn)行體外腫瘤細(xì)胞毒性及抗粘附實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明Ⅳ和Ⅴ部位及其復(fù)配物均有明顯的細(xì)胞毒性及抗粘附作用，而配伍復(fù)方效果較差。對(duì)有效部位配伍復(fù)方進(jìn)行體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)，選取3個(gè)濃度0.45g·Kg<'-1>、0.225g·Kg<'-1>、0.13g·Kg<'-1>，結(jié)果表明有效部