基于在線全二維制備液相色譜系統(tǒng)的銀杏葉化學(xué)成分研究.pdf

1、復(fù)雜成分的快速、高效分離一直是天然產(chǎn)物研究的一個(gè)難點(diǎn)，本文以銀杏葉總提取物為研究對象，以聚酰胺×C18模式的全二維制備液相色譜系統(tǒng)為主要分離手段對銀杏葉成分進(jìn)行在線的分離與純化。
　　首先，基于聚酰胺在銀杏葉成分研究上的成熟應(yīng)用，本研究將其與分離機(jī)理差異較大的C18串聯(lián)在一起，以中壓液相色譜×制備型高效液相色譜(MPLC×prep-HPLC)系統(tǒng)為基礎(chǔ)，組成聚酰胺×反相(PA×RPLC)制備型全二維液相色譜系統(tǒng)。通過該串聯(lián)模式與其

2、他幾種常用串聯(lián)模式正交性的比較，證明了該串聯(lián)模式的很好正交性。銀杏葉總樣經(jīng)過C18初步分離，共分成20％、40％、60％、80％和100％五個(gè)組分，通過綜合的考察，最終選擇了60％組分作為后續(xù)在線分離的樣品。
　　然后，在確認(rèn)了在線制備型全二維液相色譜系統(tǒng)的工作參數(shù)后，以構(gòu)建的系統(tǒng)對60％組分進(jìn)行實(shí)際在線分離。通過該系統(tǒng)一次操作，共制備得到16個(gè)單體化合物，其中13個(gè)化合物以核磁共振和質(zhì)譜數(shù)據(jù)對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。將該結(jié)果與傳統(tǒng)一維

3、制備的分離結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)，該系統(tǒng)在獲得的化合物數(shù)目、純度和速度方面都遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)方法，顯示了很高的分離效率。
　　最后，以簡單的一維制備技術(shù)，通過制備條件的優(yōu)化，對80％組分和100％組分進(jìn)行制備分離，共得到5個(gè)雙黃酮化合物。通過在線全二維制備液相色譜和傳統(tǒng)一維制備液相色譜，本研究共制備得到21個(gè)化合物，其中18個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)通過核磁共振和質(zhì)譜手段得以表征。本研究實(shí)現(xiàn)了以在線手段快速、高效分離銀杏葉中的成分，為將來銀杏葉全息圖譜的構(gòu)