大葉鐵線蓮全草中的化學(xué)成分研究.pdf

1、毛茛科鐵線蓮屬植物應(yīng)用廣泛，主要用于祛風(fēng)除濕、解毒消腫。藥理研究表明本屬植物具有抗炎、抗腫瘤的作用。本屬植物大葉鐵線蓮主要分布于我國的陜西、江蘇、山東、河北、湖南、湖北等地區(qū)，常見于山坡溝谷、林邊及路旁的灌叢中，資源豐富。迄今為止，其化學(xué)成分未見報(bào)道。本課題首次對(duì)大葉鐵線蓮的全草進(jìn)行化學(xué)成分及初步藥理活性的研究，以期獲得結(jié)構(gòu)新穎且活性好的化合物，為大葉鐵線蓮的應(yīng)用及研究提供理論基礎(chǔ)和依據(jù)。
　　本課題采用75％的乙醇提取，利用正反

2、相硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、半制備高效液相色譜等分離方法從全草中得到單體化合物，根據(jù)其理化性質(zhì)和波譜技術(shù)鑒定化學(xué)結(jié)構(gòu)；采用堿水解并分離獲得次生產(chǎn)物(次級(jí)苷)。共鑒定了27個(gè)單體化合物，其中，從正丁醇層萃取部位分離并鑒定了22個(gè)化合物，分別為：木栓酮(1)，表木栓醇(2)，β-谷甾醇(3)，金絲桃苷(4)，異葒草素(5)，刺楸皂苷G(6)，紅毛七皂苷D(7)，yemHOSide YM32(8)，huzhangos

3、ide B(9)，clematiganosideA(10)，hlazhangoside c(11)，flaccidoside II(12)，3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(13)，刺楸皂苷B(14)，clemargenoside B(15)，刺五加苷A1(16)，3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-

4、28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(17)，3-O-β-D-吡喃木糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(18)，3β-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-齊墩果-18-烯-28-酸-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-

5、D-吡喃葡萄糖苷(19)，3β-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果-18-烯-28-酸-O—α—L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(20)，3β-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果-18-烯-28-酸-O-α—L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(21)和3β，23-二羥基-齊墩果-18-烯-28-酸-O-α-L-吡喃鼠

6、李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(22)。把化合物7、9、19、20和2l經(jīng)過堿水解得到的產(chǎn)物分別是：3—O-α-L-吡喃阿拉伯糖．常春藤苷(7a)，saponin CP4(9a)，3β-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-黃蓮木酸苷(19a)，3β-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-黃蓮木酸苷(20a)和3β-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖-黃蓮木酸苷(21a

7、)。所有化合物均從該植物中首次得到，其中皂苷19～22是新化合物，分別命名為大葉鐵線蓮皂苷A(19)、大葉鐵線蓮皂苷B(20)、大葉鐵線蓮皂苷C(21)和大葉鐵線蓮皂苷D(22)，化合物19a、20a和21a是新的人工產(chǎn)物，化合物8是從本屬植物中首次得到。
　　將9個(gè)原生皂苷和5個(gè)經(jīng)堿水解獲得的次級(jí)皂苷用MTT法進(jìn)行抗腫瘤活性的篩選，采用阿霉素為陽性對(duì)照，發(fā)現(xiàn)5個(gè)28位羧基游離的單糖鏈次級(jí)苷7a、9a、19a、20a和21a對(duì)乳腺

8、癌MDA—MB-231細(xì)胞有不同程度的細(xì)胞毒性，其中9a的細(xì)胞毒性最為顯著，且9a對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞的毒性也很突出，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)次級(jí)苷7a、9a、19a、20a和21a對(duì)MDA—MB-231細(xì)胞的毒性強(qiáng)于SGC-7901細(xì)胞，而9個(gè)雙糖鏈原生苷和1個(gè)3位羥基游離的單糖鏈皂苷均無活性。結(jié)果表明：齊墩果烷型三萜皂苷具有腫瘤細(xì)胞毒性的必要條件之-是28位羧基游離的單糖鏈結(jié)構(gòu)。這進(jìn)-步驗(yàn)證了文獻(xiàn)中對(duì)該類型皂苷構(gòu)效關(guān)系的報(bào)道。研究提示：對(duì)于

9、主要含雙糖鏈三萜皂苷的中草藥提取物，通過簡單的堿水解方式制備具有抗腫瘤作用的制劑可能會(huì)是-條可行的途徑。
　　課題創(chuàng)新性及研究意義：
　　1．首次對(duì)大葉鐵線蓮全草的化學(xué)成分進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究，鑒定了27個(gè)單體化合物，其中齊墩果烷型皂苷22個(gè)(包括5個(gè)次級(jí)苷)、木栓烷型三萜2個(gè)、黃酮苷2個(gè)、植物甾醇1個(gè)，初步對(duì)其化學(xué)成分有了認(rèn)識(shí)。
　　2．化學(xué)新穎性：發(fā)現(xiàn)了4個(gè)新化合物，它們苷元的雙鍵位于18(19)位，在本屬植物中比

10、較罕見，且其中-個(gè)化合物(21)的3位糖鏈連接順序在該屬植物皂苷中首次發(fā)現(xiàn)；另有1種化合物從該屬植物中首次獲得；所有化合物均從該植物中首次分離得到。另外，通過對(duì)部分化合物的堿水解得到5個(gè)次級(jí)皂苷，其中3個(gè)為新的人工產(chǎn)物。
　　3．對(duì)部分單體化合物進(jìn)行腫瘤細(xì)胞毒活性篩選，初步討論了受試樣品的構(gòu)效關(guān)系，并提出將以雙糖鏈三萜皂苷為主要成分的樣品通過堿水解方式開發(fā)為抗癌新藥的思路。
　　4．本課題為合理利用大葉鐵線蓮的藥用資源提供了