關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射不同濃度木瓜蛋白酶建立小鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型的研究.pdf

1、目的:通過對(duì)昆明小鼠膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射不同濃度木瓜蛋白酶混合溶液及探討中醫(yī)藥治療膝骨關(guān)節(jié)炎的優(yōu)勢(shì),明確關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射不同濃度木瓜蛋白酶建立小鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型的可行性,為建立重復(fù)性好、能大量運(yùn)用于中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)的骨關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型,為尋求有效的骨關(guān)節(jié)炎治療提供實(shí)驗(yàn)室支持。
　　方法:①健康10周齡雄性昆明小鼠80只,平均體重(45±3)g,按照隨機(jī)數(shù)字表法均分為2％木瓜蛋白酶組、4％木瓜蛋白酶組、8％木瓜蛋白酶組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)開始的第1、3、5

2、天分組行右膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射2％、4％、8％(w/v)木瓜蛋白酶和0.03mol/L和L-半胱氨酸的混合溶液0.25ml/kg或等量生理鹽水。②整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程觀察小鼠的一般情況、記錄體重及右膝關(guān)節(jié)寬度、關(guān)節(jié)液白細(xì)胞計(jì)數(shù)。所有小鼠首次注射后第1周用頸椎脫臼法處死,取出關(guān)節(jié)標(biāo)本制成切片、常規(guī)HE染色及甲苯胺藍(lán)染色。鏡下觀察染色情況、軟骨細(xì)胞、軟骨基質(zhì)、結(jié)構(gòu)的改變并行Mankin評(píng)分。
　　結(jié)果:①造模組的右膝關(guān)節(jié)均出現(xiàn)腫脹、屈伸功能障礙、跳

3、步、拖步、活動(dòng)減少等膝骨關(guān)節(jié)炎癥狀,并檢測到膝關(guān)節(jié)寬度增大;②病理切片觀察:造模組染色變淺、軟骨層變薄、基質(zhì)分解破壞等病理學(xué)改變,并隨木瓜蛋白酶濃度的增高而嚴(yán)重程度加重,對(duì)照組無上述改變;③脛?dòng)蚁ス瞧脚_(tái)Mankin評(píng)分:對(duì)照組與各造模組間Mankin評(píng)分的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各造模組間脛骨平臺(tái)的 Mankin評(píng)分隨木瓜蛋白酶濃度增加而增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:昆明小鼠膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射2％、4