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1、納米羥基磷灰石對(duì)癌細(xì)胞的抑制作用一直是無機(jī)納米粒子在生物學(xué)效應(yīng)研究一個(gè)熱點(diǎn)問題。本論文以納米羥基磷灰石與核糖體的相互作用為主要研究方向,為進(jìn)一步深入研究納米羥基磷灰石的抑癌機(jī)理奠定基礎(chǔ)。本文主要從以下幾個(gè)方面研究納米羥基磷灰石的抑癌作用:納米羥基磷灰石對(duì)癌細(xì)胞和正常細(xì)胞增殖的影響;納米羥基磷灰石對(duì)細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的影響;納米羥基磷灰石與蛋白質(zhì)、DNA和RNA結(jié)合情況;納米羥基磷灰石與核糖體吸附性分析。
通過化學(xué)沉降法制備納米
2、羥基磷灰石粒子,將其與正常細(xì)胞和癌細(xì)胞作用,分別用MTT法和Alamar Blue熒光法檢測(cè)納米羥基磷灰石對(duì)這兩種細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果表明納米羥基磷灰石對(duì)癌細(xì)胞和正常細(xì)胞增殖的抑制作用具有顯著差異,納米羥基磷灰石對(duì)癌細(xì)胞的增殖具有劑量依賴的抑制作用,而對(duì)正常細(xì)胞無明顯抑制作用。使用羥基磷灰石處理細(xì)胞后,提取細(xì)胞總RNA進(jìn)行體外表達(dá),在蛋白表達(dá)水平上驗(yàn)證了納米羥基磷灰石對(duì)癌細(xì)胞蛋白的抑制作用。通過分光光度法研究了納米羥基磷灰石在體外與牛血
3、清白蛋白、pUC18以及大鼠肝臟總RNA的結(jié)合情況,發(fā)現(xiàn)不同粒徑的納米羥基磷灰石對(duì)蛋白質(zhì)、DNA、RNA具有不同的結(jié)合能力。最后,本研究利用組織勻漿和超速離心得到的大鼠肝核糖體與納米羥基磷灰石在體外共孵育,檢測(cè)mRNA與核糖體結(jié)合情況,結(jié)果表明納米羥基磷灰石可以較強(qiáng)地與核糖體結(jié)合,從而抑制了核糖體與mRNA的結(jié)合。
本研究通過一系列實(shí)驗(yàn),證實(shí)了納米羥基磷灰石可以作用于細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、DNA、RNA,干擾mRNA與核糖體的相
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