胰腺癌中ABCG2和P-gp的表達(dá)和意義.pdf

1、胰腺癌是預(yù)后最差的腫瘤之一,與腫瘤多藥耐藥和腫瘤干細(xì)胞有關(guān),腫瘤干細(xì)胞特性之一的SP表型主要與ABCG2的有關(guān),ABCG2與P-gp同屬于ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族成員。由于ABCG2和P-gp有類似藥理學(xué)功能,在正常組織器官中分布相似,并且兩者在腫瘤中表達(dá)與缺氧等腫瘤微環(huán)境相關(guān),所以本研究將對(duì)胰腺癌中此兩種蛋白與臨床特征之間及兩種蛋白間相關(guān)性進(jìn)行研究,以推測(cè)兩者是否存在相同蛋白表達(dá)調(diào)控途徑。
　　 本研究采用免疫組織化學(xué)的SP

2、法檢測(cè)ABCG2和P-gp在胰腺癌細(xì)胞中表達(dá),用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析ABCG2和P-gp二者表達(dá)有無相關(guān)性及其在胰腺癌細(xì)胞中的表達(dá)與腫瘤大小、手術(shù)病理分期、病理組織分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的臨床病理因素之間的關(guān)系。
　　 實(shí)驗(yàn)方法
　　 1、病例和標(biāo)本
　　 選取中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院普外科2006年-2009年手術(shù)切除的胰腺腫瘤和十二指腸乳頭癌及十二指腸癌(均未侵犯胰腺)手術(shù)切除的正常胰腺石蠟組織標(biāo)本。所有標(biāo)本均有詳細(xì)臨床

3、資料,均為初發(fā)病例,手術(shù)前未接受放療、化療等抗腫瘤治療。胰腺癌組共67例,取自十二指腸乳頭癌和十二指腸癌癌腫均未侵犯胰腺組織的手術(shù)切除的正常胰腺12例。
　　 2、試劑
　　 ABCG2單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)santa公司,P-gp單克隆抗體和通用型S-P免疫組化染色試劑盒,購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司,DAB顯色試劑盒,購(gòu)自北京中衫金橋生物技術(shù)有限公司。
　　 3、方法
　　 制作胰腺癌組織芯片。采用免

4、疫組化SP法,嚴(yán)格按照SP檢測(cè)試劑盒說明書所示步驟進(jìn)行,切片經(jīng)乙二胺四乙酸緩沖液(PH=9.0)高壓熱修復(fù)預(yù)處理。
　　 4、結(jié)果判定
　　 ABCG2和P-gp均以胞膜和胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒判定為顯色,選取5個(gè)高倍鏡視野(X 400)作陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù),以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤5％為陰性,>5％為陽(yáng)性。
　　 5、統(tǒng)計(jì)方法分析
　　 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,率的比較采用卡方檢驗(yàn)；ABCG2和P-gp表達(dá)

5、的相關(guān)性采用Spearman秩和相關(guān)分析,P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,所有檢驗(yàn)的P值均為雙側(cè)。
　　 結(jié)果：
　　 1、ABCG2蛋白陽(yáng)性表達(dá)位于腫瘤細(xì)胞胞膜和細(xì)胞質(zhì),未見核膜陽(yáng)性表達(dá)。ABCG2陽(yáng)性42例(62.7％),陰性25例(37.3％)。P-gp陽(yáng)性表達(dá)位于腫瘤細(xì)胞胞膜和細(xì)胞質(zhì)。P-gp的陽(yáng)性54例(80.6％),P-gp陰性表達(dá)13例(19.4％)。ABCG2和P-gp于正常胰腺12例均為陰性表達(dá)。
　　

6、 2、ABCG2與腫塊大小(r=0.305,p=0.012)呈正相關(guān),與腫瘤分化(r=-0.325,p=0.014)呈負(fù)相關(guān),有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,與臨床分期,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)。P-gp 與腫塊大小臨床分期、腫瘤分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)(P>0.05)
　　 3、ABCG2與p-gp的表達(dá)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析為正相關(guān)r=0.246,P為0.045<0.05。
　　 結(jié)論：
　　 1、胰腺癌ABCG2表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞可視為腫瘤干細(xì)胞研