大鼠胰島β細(xì)胞GPR40表達(dá)與內(nèi)臟脂肪含量及胰島素1相分泌的關(guān)系.pdf

1、研究背景：
　　糖尿病，是一種由于胰島素對糖代謝的調(diào)節(jié)障礙所致的代謝性疾病，以血糖水平持續(xù)升高為特征，最終會導(dǎo)致機(jī)體各器官的損害。由于發(fā)病率的不斷升高，目前已成為世界性的健康問題。肥胖是導(dǎo)致糖尿病的危險因素之一，研究顯示，肥胖與胰島素抵抗和2型糖尿?。╰ype2diabetesmellitus,T2DM）密切相關(guān)。有研究者認(rèn)為，脂代謝紊亂是糖尿病的原發(fā)病理生理變化，即脂毒性學(xué)說，并提出糖尿病其實是糖脂病的觀點(diǎn)。
　　肥胖所致

2、的內(nèi)臟脂肪沉積和血游離脂肪酸（freefattyacid,FFA）水平的升高是導(dǎo)致脂毒性的關(guān)鍵因素。FFA通常被認(rèn)為通過其進(jìn)入細(xì)胞后的一系列代謝反應(yīng)及產(chǎn)生脂質(zhì)衍生物調(diào)節(jié)胰島素的分泌。2003年，Itoh等研究者提出G蛋白偶聯(lián)受體40(Gproteincoupledreceptor40,GPR40)作為中、長鏈游離脂肪酸的受體在胰島β細(xì)胞高表達(dá)，并指出其參與了FFA介導(dǎo)的胰島素分泌并且可能與肥胖介導(dǎo)的T2DM有關(guān)，使GPR40成為治療T2

3、DM可能的藥物靶點(diǎn)。研究顯示，F(xiàn)FA能夠通過激活胰島β細(xì)胞的GPR40增加葡萄糖刺激的胰島素分泌（glucose-stimulatedinsulinsecretion,GSIS）[1,2]。通過siRNA下調(diào)β細(xì)胞GPR40的表達(dá)會導(dǎo)致FFA介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)Ca2+應(yīng)答及胰島素分泌的顯著抑制，提示胰島β細(xì)胞GPR40通過介導(dǎo)β細(xì)胞Ca2+信號反應(yīng)參與了FFA刺激的胰島素分泌[3、4]。表明GPR40可能對肥胖狀態(tài)下葡萄糖刺激的胰島素分泌存在

4、調(diào)控作用。隨后的研究對于GPR40是否參與了FFA水平長期升高導(dǎo)致的胰島素抵抗(insulinresistance,IR)及T2DM的發(fā)生進(jìn)行了進(jìn)一步探討，然而結(jié)果卻不盡相同。Steneberg[5]等認(rèn)為GPR40參與了FFA慢性作用對胰島素分泌的損害作用，提出GPR40拮抗劑可以作為有效的治療策略預(yù)防和治療肥胖介導(dǎo)的T2DM。而Naqasumi[6]則認(rèn)為GPR40對改善IR狀態(tài)下的GSIS發(fā)揮了作用。因此，對于GPR40與肥胖和胰

5、島素抵抗的關(guān)系還需進(jìn)一步深入研究。
　　已知肥胖時內(nèi)臟脂肪沉積增加，但GPR40在胰島β細(xì)胞表達(dá)水平的變化與內(nèi)臟脂肪含量的關(guān)系，及其表達(dá)是否對正常大鼠GSIS也存在調(diào)控作用目前還未見報道，本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)法結(jié)合激光掃描共聚焦顯微鏡（laserscanningconfocalmicroscope,LSCM）技術(shù)研究GPR40在不同體重組SD大鼠胰島β細(xì)胞的表達(dá)水平，分析GPR40表達(dá)與內(nèi)臟脂肪含量及胰島素1相分泌的關(guān)系。

6、>　　目的：
　　觀察不同體重SD大鼠胰島β細(xì)胞G蛋白偶聯(lián)受體40（GPR40）表達(dá)水平與內(nèi)臟脂肪含量及胰島素1相分泌之間的關(guān)系。
　　方法：
　　1、標(biāo)準(zhǔn)飲食的SD大鼠按體重分為3組（100g組、200g組、300g組）；
　　2、行靜脈糖耐量實驗；
　　3、放射免疫法檢測血胰島素水平；
　　4、采用膠原酶原位灌注法分離胰島；
　　5、留取內(nèi)臟脂肪及肝臟稱重；
　　6、應(yīng)用免疫組織化學(xué)法

7、結(jié)合激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)對胰島β細(xì)胞表達(dá)的GPR40進(jìn)行定位，并行半定量分析。
　　結(jié)果：
　　1、隨著大鼠體重的增加，內(nèi)臟脂肪含量、肝臟重量和體脂比明顯增加。
　　2、3組大鼠空腹血糖、靜脈糖耐量及胰島素1相分泌之間無顯著差異。
　　3、300g組大鼠胰島β細(xì)胞GPR40表達(dá)較100g及200g大鼠明顯增加。
　　結(jié)論：
　　1、大鼠胰島β細(xì)胞GPR40表達(dá)的變化可能與內(nèi)臟脂肪含量及年齡因素有關(guān)