載納米量子點(diǎn)酸度敏感聚合物微球的研究.pdf

1、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等生物大分子藥物均需在靶細(xì)胞的特定細(xì)胞器中才能發(fā)揮作用，藥物及其制劑常進(jìn)入溶酶體處被酶和酸性環(huán)境所破壞，因此能否有效逸出內(nèi)涵體進(jìn)入細(xì)胞漿是亞細(xì)胞藥物傳遞中的關(guān)鍵。酸度敏感聚合物在中性和堿性的條件下穩(wěn)定，酸性條件下降解加速。因此，利用細(xì)胞中不同細(xì)胞器之間存在的酸度梯度，酸度敏感載體材料被細(xì)胞吞噬后進(jìn)入內(nèi)涵體，在酸性條件下發(fā)生降解，破壞內(nèi)涵體并攜載藥物進(jìn)入細(xì)胞漿中。量子點(diǎn)由于其獨(dú)特的光化學(xué)性質(zhì)，作為新型的熒光發(fā)光物質(zhì)在生物

2、學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究中越來(lái)越受到關(guān)注。但其生物安全性和進(jìn)入細(xì)胞后的穩(wěn)定性以及熒光壽命等問(wèn)題有待進(jìn)一步研究。本論文采用酸度敏感聚合物包裹納米量子點(diǎn)，制備微球制劑，研究微球的發(fā)光行為，考察微球的酸度敏感特征和細(xì)胞毒性，利用微球的發(fā)光行為研究細(xì)胞對(duì)微球的吞噬效率和細(xì)胞內(nèi)遷移和分布行為。
　　 以含半乳糖基酸度敏感聚合物(PGBELA)、含縮醛結(jié)構(gòu)的酸度敏感聚合物(PBELA)和聚乙二醇與聚乳酸共聚物(PELA)為載體材料，采用納米沉淀法

3、制備包裹納米量子點(diǎn)的微球。掃描電子顯微鏡(SEM)、透射電子顯微鏡(TEM)和原子力顯微鏡(AFM)觀察結(jié)果表明微球形態(tài)規(guī)整，大小均一，平均粒徑約為200nm。火焰原子吸光譜法(AAS)測(cè)得量子點(diǎn)攜載效率可達(dá)到50-60％。熒光分光光度計(jì)(FL)、紅外光譜儀(FT-IR)和X射線衍射儀(XRD)證實(shí)聚合物與包裹量子點(diǎn)之間存在一定的相互作用，聚合物包覆沒(méi)有改變量子點(diǎn)的發(fā)光性能，同時(shí)由于聚合物層的保護(hù)作用，量子點(diǎn)的發(fā)光穩(wěn)定性顯著地提高。

4、r>　　 在pH7.4、pH6.0和pH5.0緩沖溶液中，評(píng)價(jià)了不同微球熒光衰減情況、紅細(xì)胞膜破壞程度和基質(zhì)聚合物降解行為。QD/PBELA和QD/PGBELA微球酸性條件下時(shí)，其熒光強(qiáng)度迅速衰減，且隨緩沖液pH值的降低其衰減趨勢(shì)更加明顯；PBELA和PGBELA空白微球置于酸性條件下時(shí)，紅細(xì)胞膜破壞程度大大增強(qiáng)；體外降解結(jié)果表明，PELA微球在中性和酸性條件下、PBELA和PGBELA微球在pH7.4緩沖溶液中的降解行為類似，但PB

5、ELA和PGBELA微球在酸性條件下的微球重量和分子量降低明顯加快，顯示載體聚合物PGBELA和PBELA具有酸度敏感性。
　　 體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明三種聚合物的空白微球?qū)θN細(xì)胞的生長(zhǎng)均沒(méi)有明顯的抑制作用，而在包裹量子點(diǎn)微球中，隨著量子點(diǎn)濃度的增加，細(xì)胞的增殖能力也呈現(xiàn)出相應(yīng)的遞減趨勢(shì)，說(shuō)明了量子點(diǎn)的細(xì)胞毒性效應(yīng)與濃度呈明顯的劑量關(guān)系。乳腺癌和成纖維細(xì)胞對(duì)三種微球的吞噬效率大約在40％左右，無(wú)顯著性差異，而肝癌細(xì)胞對(duì)QD/PG