一株油松毛蟲病原真菌卵孢白僵菌的研究.pdf

1、油松毛蟲(Dentrolimus tabulaeformis Tsai et Liu)屬鱗翅目(Lepidoptera)枯葉蛾科(Lasiocampidae)松毛蟲屬（Dendrolimus），是我國北方森林危害最大的食葉害蟲。以往對油松毛蟲的防治主要依賴飛機噴灑殺蟲劑和林間施放煙霧劑等化學(xué)防治手段。隨著天然林保護(hù)工程的啟動，采用生物方法防治油松毛蟲對保護(hù)森林生態(tài)系統(tǒng)防止環(huán)境污染顯得特別重要。本文從承德地區(qū)油松林內(nèi)，采集油松毛蟲越冬幼蟲

2、的致病蟲尸，分離出一株致病菌株，研究了該菌株的形態(tài)特征、分類地位、生物學(xué)特性、固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)、代謝毒素等方面進(jìn)行了研究，結(jié)果如下:
　　1.分類地位:經(jīng)形態(tài)學(xué)特征鑒定所得到的菌株為半知菌亞門(Deuteromycotina)絲孢綱(Hyphomyceres)絲孢目(Hyphomycetes)白僵菌屬（Beauveria）的卵孢白僵菌（Beauveria tenella）。
　　形態(tài)特征為:菌絲棉絮狀，表面色澤白色，在PD

3、A培養(yǎng)基上呈不同程度的淺紫色至紅色，菌絲長而細(xì)，直徑1.5-2.0μm，具有隔膜。產(chǎn)孢細(xì)胞有各種形狀，膨大的至細(xì)絲狀生于主干的分枝上，或與主軸呈直角的小枝梗上聚集成緊密的頭狀。孢子亞圓至橢圓形，長直徑為2.0μm-6.0μm，短直徑1.5μm-3.0μm，生于產(chǎn)孢細(xì)胞頂端所延伸的“之”字型絲狀器上。
　　生物學(xué)特性:該菌株在溫度20℃-25℃范圍內(nèi)最適宜生長，生長速率達(dá)到0.7cm/d-0.8cm/d，產(chǎn)孢量達(dá)到3.6×108個/

4、cm2-4.2×108n/cm2。在溫度為25℃，相對濕度在75％時，孢子萌發(fā)率可達(dá)93.2％。
　　2.代謝毒素:對這株卵孢白僵菌進(jìn)行了液體培養(yǎng)，其發(fā)酵液的乙酸乙酯粗提物對油松毛蟲具有殺蟲活性，校正死亡率為42.52％。對粗提物進(jìn)行了硅膠色譜分離，共得到6組物質(zhì)，其中第6組物質(zhì)對油松毛蟲的校正致死率達(dá)80.26％。利用GC/MS對第6組物質(zhì)進(jìn)行分析，其包括17個組分，其中相對含量大于10％的有:2-哌啶酮占14.02％，2-香豆

5、滿酮占47.10％，六氫化-吡咯環(huán)[1，2-a]吡嗪-1，4-二酮占21.05％。用其中的2-哌啶酮和2-香豆?jié)M酮分別對油松毛蟲進(jìn)行殺蟲試驗，校正死亡率分別為83.32％和91.61％，證明這兩種物質(zhì)為高殺蟲活性的毒素物質(zhì)。
　　3.固體培養(yǎng):對該菌株的固體擴大培養(yǎng)條件的試驗，篩選出產(chǎn)生孢子量最多的固體培養(yǎng)基配方為60％麥麩+5％谷殼+30％玉米粉+5％黃豆粉，其產(chǎn)孢量可達(dá)1.94×109;確定了培養(yǎng)基最初的適宜含水率控制在45％