一株油松毛蟲病原真菌卵孢白僵菌的研究.pdf

1、油松毛蟲(Dentrolimus tabulaeformis Tsai et Liu)屬鱗翅目(Lepidoptera)枯葉蛾科(Lasiocampidae)松毛蟲屬（Dendrolimus），是我國北方森林危害最大的食葉害蟲。以往對油松毛蟲的防治主要依賴飛機(jī)噴灑殺蟲劑和林間施放煙霧劑等化學(xué)防治手段。隨著天然林保護(hù)工程的啟動，采用生物方法防治油松毛蟲對保護(hù)森林生態(tài)系統(tǒng)防止環(huán)境污染顯得特別重要。本文從承德地區(qū)油松林內(nèi)，采集油松毛蟲越冬幼蟲

2、的致病蟲尸，分離出一株致病菌株，研究了該菌株的形態(tài)特征、分類地位、生物學(xué)特性、固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)、代謝毒素等方面進(jìn)行了研究，結(jié)果如下:
　　1.分類地位:經(jīng)形態(tài)學(xué)特征鑒定所得到的菌株為半知菌亞門(Deuteromycotina)絲孢綱(Hyphomyceres)絲孢目(Hyphomycetes)白僵菌屬（Beauveria）的卵孢白僵菌（Beauveria tenella）。
　　形態(tài)特征為:菌絲棉絮狀，表面色澤白色，在PD

3、A培養(yǎng)基上呈不同程度的淺紫色至紅色，菌絲長而細(xì)，直徑1.5-2.0μm，具有隔膜。產(chǎn)孢細(xì)胞有各種形狀，膨大的至細(xì)絲狀生于主干的分枝上，或與主軸呈直角的小枝梗上聚集成緊密的頭狀。孢子亞圓至橢圓形，長直徑為2.0μm-6.0μm，短直徑1.5μm-3.0μm，生于產(chǎn)孢細(xì)胞頂端所延伸的“之”字型絲狀器上。
　　生物學(xué)特性:該菌株在溫度20℃-25℃范圍內(nèi)最適宜生長，生長速率達(dá)到0.7cm/d-0.8cm/d，產(chǎn)孢量達(dá)到3.6×108個/

4、cm2-4.2×108n/cm2。在溫度為25℃，相對濕度在75％時，孢子萌發(fā)率可達(dá)93.2％。
　　2.代謝毒素:對這株卵孢白僵菌進(jìn)行了液體培養(yǎng)，其發(fā)酵液的乙酸乙酯粗提物對油松毛蟲具有殺蟲活性，校正死亡率為42.52％。對粗提物進(jìn)行了硅膠色譜分離，共得到6組物質(zhì)，其中第6組物質(zhì)對油松毛蟲的校正致死率達(dá)80.26％。利用GC/MS對第6組物質(zhì)進(jìn)行分析，其包括17個組分，其中相對含量大于10％的有:2-哌啶酮占14.02％，2-香豆

5、滿酮占47.10％，六氫化-吡咯環(huán)[1，2-a]吡嗪-1，4-二酮占21.05％。用其中的2-哌啶酮和2-香豆?jié)M酮分別對油松毛蟲進(jìn)行殺蟲試驗，校正死亡率分別為83.32％和91.61％，證明這兩種物質(zhì)為高殺蟲活性的毒素物質(zhì)。
　　3.固體培養(yǎng):對該菌株的固體擴(kuò)大培養(yǎng)條件的試驗，篩選出產(chǎn)生孢子量最多的固體培養(yǎng)基配方為60％麥麩+5％谷殼+30％玉米粉+5％黃豆粉，其產(chǎn)孢量可達(dá)1.94×109;確定了培養(yǎng)基最初的適宜含水率控制在45％