江蘇寧、鎮(zhèn)地區(qū)草莓灰葡萄孢菌抗藥性檢測及對咯菌腈的抗藥性機制研究.pdf

1、由灰葡萄孢菌（BotrytiscinereaPers.）引起的植物灰霉病是全球的十大病害之一?；移咸焰呔a(chǎn)孢數(shù)量巨大、可侵染寄主繁多和變異速度快，是導致灰霉病難以可持續(xù)控制的主要因素。目前該病防控主要以化學防治為主;國內(nèi)外已有灰葡萄孢菌對殺菌劑抗藥性的很多報道，該病原菌的多重抗藥性已成為研究熱點。
　　為了明確江蘇寧、鎮(zhèn)地區(qū)草莓灰葡萄孢菌的抗藥性概況，本文檢測了2012年從江蘇省鎮(zhèn)江市和南京市分離的290個草莓灰葡萄孢菌菌株對作用

2、機制不同的多菌靈、腐霉利、乙霉威、嘧霉胺、醚菌酯5種常用殺菌劑的抗藥性。以10μg/mL，50μg/mL和100μg/mL作為鑒定不同抗藥性水平菌株的區(qū)分劑量進行檢測，結果表明，多菌靈、腐霉利、乙霉威、嘧霉胺、醚菌酯的高抗頻率分別為91％、78％、10％、83％和73％，寧、鎮(zhèn)地區(qū)草莓灰葡萄孢菌的多重抗藥性比例分別占96.8％、97.8％;不同抗性背景的菌株在菌絲生長、產(chǎn)孢及致病力等性狀上有顯著差異，但無規(guī)律性;多菌靈、腐霉利、乙霉威、

3、嘧霉胺、醚菌酯在所檢測地區(qū)已經(jīng)失去使用價值。
　　江蘇寧、鎮(zhèn)地區(qū)灰葡萄孢菌多重抗藥性十分嚴重，通過篩選替代高效藥劑，可持續(xù)治理抗藥性，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)苯基吡咯類殺菌劑咯菌腈對草莓灰葡萄孢菌具有優(yōu)異的抑菌活性。因此，利用寧、鎮(zhèn)兩市分離的菌株建立了灰葡萄孢對該藥劑的敏感性基線，并評估了其對該藥劑的潛在抗性風險。結果表明:
　　(1)從采集的290個菌株中隨機選取100個菌株對咯菌腈的菌絲生長的敏感性(EC50)基線為0.0098±0.

4、005μg/mL，變化范圍為0.0016～0.0413μg/mL，最低抑制濃度(MIC)≤0.2μg/mL;
　　(2)成功獲得了2個對咯菌腈高抗的藥劑馴化突變體（抗性倍數(shù)大于500），突變頻率2％;抗藥性突變體菌絲生長速率、產(chǎn)孢能力和致病力均顯著下降，Na+脅迫時敏感性顯著增加;1μg/mL咯菌腈處理后，抗性突變體和敏感菌株胞內(nèi)甘油含量分別增加了6.5倍和3.7倍，而敏感菌株電解質滲漏增加量卻顯著高于抗性突變體;分別克隆、比對分