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1、目的:研究分析U-Ⅱ在大鼠肺動(dòng)脈高壓模型中對(duì)氣體信號(hào)通路的影響。
方法:雄性SD大鼠90只分為肺動(dòng)脈高壓模型組(S組)、假手術(shù)組(C組)、尾加壓素Ⅱ抑制劑組(M組),每組30只。使用外科手術(shù)建立分流術(shù)模型以模擬肺動(dòng)脈高壓。用Western blot法檢測(cè)肺組織中iNOS、HO-1、CSE及UⅡ蛋白表達(dá)含量,用RT-PCR法檢測(cè)肺組織中iNOS、HO1、CSE的mRNA含量,硝酸還原酶法測(cè)定血清NO含量,雙波長(zhǎng)法測(cè)定血清一氧化碳
2、含量,亞甲基藍(lán)測(cè)定血清H2S含量,放射免疫法測(cè)定血清UⅡ含量。比較分析三組間iNOS、HO-1、CSE和UⅡ蛋白及mRNA水平及NO、CO、H2S氣體含量的區(qū)別,探索UⅡ蛋白表達(dá)量同氣體信號(hào)分子含量之間的聯(lián)系。
結(jié)果:1、三組大鼠生存情況及肺動(dòng)脈壓力比較:S組術(shù)后死亡4只大鼠(死于右心衰竭),M組術(shù)后死亡3只大鼠(死于右心衰竭),C組術(shù)后死亡1只大鼠(死因不明),死亡時(shí)間多在術(shù)后2-3周;分別于造模后4周、8周、12周麻醉后測(cè)
3、右心腔壓力(相當(dāng)于肺動(dòng)脈壓力),和C組大鼠相比,S組大鼠肺動(dòng)脈壓力顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),M組較S組顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2、3組大鼠肺組織iNOS、HO-1、CSE及UⅡ蛋白表達(dá)水平比較:和C組大鼠相比,S組的iNOS蛋白含量顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),M組較S組顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);和C組大鼠相比,S組的HO-1蛋白含量無(wú)明顯差異,差異無(wú)統(tǒng)
4、計(jì)學(xué)意義(P0.05),M組較S組顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);同C組大鼠相比,S組的CSE蛋白含量顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),M組較S組顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);和C組大鼠相比,S組的U-Ⅱ蛋白含量顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),M組較S組顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3、3組大鼠的肺組織iNOS、HO-1、CSE mRNA表達(dá)水平比較:S組iNOS
5、和HO-1 mRNA表達(dá)顯著高于C組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);M組iNOS和HO-1mRNA表達(dá)顯著高于S組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);S組CSE mRNA表達(dá)顯著低于C組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);M組CSE mRNA表達(dá)顯著高于S組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
4、3組大鼠的血清NO、CO、H2S及UⅡ含量比較:S組血清NO和CO含量顯著高于C組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);M
6、組血清NO和CO含量顯著高于S組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); S組血清H2S含量顯著低于C組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);M組血清H2S含量顯著高于S組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);S組血清U-Ⅱ含量顯著高于C組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);M組血清U-Ⅱ含量顯著低于S組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
5、UⅡ蛋白表達(dá)與肺動(dòng)脈壓力呈正相關(guān)關(guān)系,和血清NO,CO及H2S含量均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,其中
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