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文檔簡介
1、目的:探討肝素對膿毒癥大鼠肺血管內(nèi)皮糖萼的保護作用及其可能的機制.
方法:健康雄性SD大鼠48只,體重200-250克,隨機分為3組(n=16):對照組(C組),LPS組(L組,LPS15mg/kg靜脈注射同時給予H組肝素等量生理鹽水泵入),肝素組(H組,LPS15mg/kg靜脈注射同時給予普通肝素100U/(kg.h)靜脈泵入)。麻醉后L組和H組分別給予LPS(O55∶B5)15mg/kg靜脈注射制備膿毒癥模型。對照組給予等
2、量生理鹽水替代。各組分別在注射LPS后第3、6小時取8只大鼠抽取血液,4℃3000r/min離心后獲取血清用于檢測血清肝素酶(HPA)、內(nèi)皮糖萼標(biāo)志物syndecan-1、硫酸肝素(HS),以及血管內(nèi)皮損傷炎癥標(biāo)志物ICAM-1,E-選擇素的含量。后處死大鼠,取右肺中上葉肺組織用于肺組織病理學(xué)檢測,右肺下葉用于實時定量PCR法檢測肺組織中HPA和syndecan-1的mRNA表達水平,另取左肺用于計算濕重/干重比值(W/D)。
3、 結(jié)果:(1)大鼠血清HPA含量,L組在3、6小時點均較C組明顯升高(3小時點69.22±10.34U/ml vs.44.01±5.77U/ml,P<0.05;6小時點84.34±7.08U/ml vs.42.85±6.40U/ml,P<0.05)。H組3小時點(54.98±6.85U/ml)和6小時點(64.97±7.69U/ml)較L組均明顯降低(P<0.05)。
(2)大鼠血清HS含量,L組在3、6小時較C組均明顯升高(
4、3小時點33.74±4.20ng/mlvs.20.50±3.18ng/ml,P<0.05;6小時點41.03±4.24ng/ml vs.20.69±3.05ng/ml,P<0.05)。 H組HS在3小時點(27.16±4.77ng/ml)、6小時點(29.62±3.81 ng/ml)較L組均明顯減少(P<0.05)。三組血清syndecan-1在3小時點三組之間沒有差別,L組在6小時點較C組明顯升高(4.70±0.30 ng/ml vs
5、.3.75±0.52ng/ml,P<0.05),同時間點H組(3.99±0.56ng/ml)與L組相比明顯降低,P<0.05。
(3)大鼠血清E-選擇素,L組在3、6小時點較C組均明顯增加(3小時點48.2±9.82ng/Lvs.27.83±4.28ng/L,P<0.05;6小時點58.81±11.48ng/L vs.27.93±4.26ng/L,P<0.05)。H組E-選擇素在3、6小時點分別為27.75±9.87ng/L和
6、28.08±6.95ng/L,較L組均明顯減少(P<0.05)。大鼠血清ICAM-1 L組3、6小時點較C組均明顯升高(3小時點319.38±82.22ng/L vs.197.14±62.16ng/L,P<0.05;6小時點458.63±65.44ng/Lvs.和192.58±54.56ng/L,P<0.05)。H組血清ICAM-1在3小時點與L組的差別沒有統(tǒng)計學(xué)意義,在6小時點是309.13±65.07ng/L,與L組相比明顯降低,P
7、<0.05。
(4)大鼠肺組織內(nèi)HPA和syndecan-1 mRNA的表達,L組在3、6小時點較C組均明顯上調(diào)(P<0.05),肝素處理后的H組HPA和syndecan-1 mRNA表達較L組明顯下調(diào)(P<0.05)。
(5)肺W/D比值,L組在3、6小時點較C組均明顯增高(P<0.05); H組3小時點與L組相比沒有差異(P>0.05),而在6小時較L組明顯減小(P<0.05)。
(6)光鏡下可見C組大
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