超聲對(duì)SK-N-SH細(xì)胞化療敏感性的影響及機(jī)制探討.pdf

1、第一部分超聲輻照對(duì)SK-N-SH細(xì)胞存活率的影響。 目的：研究不同時(shí)間的超聲輻照對(duì)SK-N-SH細(xì)胞存活率的影響，確定下一步實(shí)驗(yàn)所用的超聲輻照參數(shù)。 方法：使用不同的時(shí)間(10-100秒)對(duì)SK-N-SH細(xì)胞進(jìn)行超聲輻照，用MTT法檢測(cè)輻照后細(xì)胞的存活率。 結(jié)果：不同時(shí)間的超聲輻照后，SK-N-SH細(xì)胞存活率由99％降至11％，輻照時(shí)間越長(zhǎng)，細(xì)胞存活率越低。輻照時(shí)間≤40秒，細(xì)胞存活率>90％。 結(jié)論：超

2、聲波對(duì)SK-N-SH細(xì)胞有細(xì)胞毒作用，輻照時(shí)間與細(xì)胞存活率之間呈現(xiàn)明顯的量效關(guān)系。確定40秒為下一步實(shí)驗(yàn)所用超聲輻照時(shí)間。 第二部分超聲對(duì)SK-N-SH細(xì)胞化療敏感性的影響及其機(jī)制探討。 目的：研究超聲輻照對(duì)SK-N-SH細(xì)胞化療敏感性的影響，并初步探討其作用機(jī)制。 方法： 1、將SK-N-SH細(xì)胞分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組又分為VCR組、VCR+U組。VCR組細(xì)胞加入不同濃度的VCR，進(jìn)行超聲假照。VC

3、R+U組細(xì)胞在加入不同濃度的VCR后再接受超聲輻照(頻率：0.8MHz，聲強(qiáng)：1W/cm<'2>，時(shí)間：40s)，用MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞的存活率。 2、用掃描電鏡觀察超聲輻照前后細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變。 3、用免疫組化方法檢測(cè)超聲輻照前后細(xì)胞P-gp表達(dá)的變化。 結(jié)果： 1、VCR+U組細(xì)胞存活率較VCR組明顯降低。 2、掃描電鏡發(fā)現(xiàn)超聲輻照后細(xì)胞膜上出現(xiàn)大小不一的孔，微絨毛減少或者脫落。 3

4、、超聲輻照后SK-N-SH細(xì)胞P-gp的表達(dá)較對(duì)照組降低。 結(jié)論： 1、超聲可以增強(qiáng)化療藥物長(zhǎng)春新堿對(duì)SK-N-SH細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。 2、超聲輻照使SK-N-SH細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)發(fā)生損害。 3、超聲輻照可以使SK-N-SH細(xì)胞P-gp的表達(dá)降低，超聲可以逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的MDR。 總結(jié)論： 1、實(shí)驗(yàn)對(duì)SK-N-SH細(xì)胞采用不同時(shí)間進(jìn)行超聲輻照，結(jié)果顯示超聲波能夠降低SK-N-SH細(xì)胞存活率，輻照時(shí)

5、間越長(zhǎng)，細(xì)胞存活率越低，輻照時(shí)間與細(xì)胞存活率之間呈現(xiàn)明顯的量效關(guān)系，表明超聲波對(duì)SK-N-SH細(xì)胞有細(xì)胞毒作用。 2、超聲輻照時(shí)間≤40秒，細(xì)胞存活率>90％，該劑量的超聲輻照不會(huì)造成SK-N-SH細(xì)胞急性死亡，確定40秒為第二部分實(shí)驗(yàn)所用輻照時(shí)間參數(shù)。 3、超聲可以增強(qiáng)化療藥物長(zhǎng)春新堿對(duì)SK-N-SH細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。該作用在長(zhǎng)春新堿濃度較低時(shí)更明顯。 4、超聲增強(qiáng)SK-N-SH細(xì)胞化療敏感性的機(jī)制：(1)超聲