FK506對糖尿病大鼠腎臟足細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.pdf

1、背景:糖尿病腎病(diabeticnephropathy，DN)是糖尿病最常見的微血管并發(fā)癥，發(fā)病率逐年增加，在終末期腎病中所占比例越來越大。DN是一個漸進(jìn)發(fā)展的過程，臨床早期表現(xiàn)為腎小球高濾過狀念和尿白蛋白排泄率（微量白蛋白）的增加，繼之出現(xiàn)臨床蛋白尿，蛋白尿是DN主要的臨床表現(xiàn)，也是引起腎臟損傷的獨立危險因素.因此積極探討蛋白尿的發(fā)生機(jī)制，顯的尤為重要.近年來，對于蛋白尿發(fā)生機(jī)制的研究取得了可喜的成果，已證實足細(xì)胞病變在蛋白尿的發(fā)生

2、發(fā)展過程中起著重要的作用，發(fā)現(xiàn)腎小球足細(xì)胞裂孔隔膜上多個蛋白分子如Nephrin與Podocin表達(dá)及分布異常是DN蛋白尿發(fā)生的重要機(jī)制。Nephrin蛋白是1998年瑞典教授KarlTryggvason在研究先天性腎病綜合征芬蘭型時發(fā)現(xiàn)的，研究表明Nephrin蛋白特異性表達(dá)于裂孔隔膜，在裂孔區(qū)個相鄰足突間彼此相對延伸，同嗜性集合形成一個拉鏈樣多孔濾過結(jié)構(gòu)。Nephrin基因突變導(dǎo)致蛋白的丟失和濾過屏障的破壞，同時影響細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白

3、之間的相互作用導(dǎo)致肌動蛋白細(xì)胞骨架重排和足突消失，最終導(dǎo)致大量蛋白尿.
　　 FK506是1984年從土壤微生物培養(yǎng)基中分離出來的一種新型免疫抑制劑，其結(jié)構(gòu)與環(huán)孢菌A(CyclosporinA，CsA)不同，但卻有著相似的廣泛的免疫抑制作用，作用強(qiáng)度是CsA的10.100倍，它己廣泛用于預(yù)防和治療肝、腎、小腸、骨髓等器官移植術(shù)后的免疫排斥反應(yīng)?，F(xiàn)在FK506的應(yīng)用越來越廣泛，已有報道FK506可有效治療Heymann腎炎、腎中毒

4、血清腎炎、狼瘡腎和腎小球系膜增生性腎炎模型，明顯延緩其腎小球硬化和腎小管間質(zhì)損傷.亦有研究表明，應(yīng)用FK506可明顯抑制糖尿病大鼠早期腎臟肥大和尿白蛋白排泄率的增加，為FK506應(yīng)用于糖尿病腎病提供了理論依據(jù)，但對其作用機(jī)制是否與腎小球足細(xì)胞的保護(hù)作用有關(guān)，未作相關(guān)研究.本研究以Nephrin為切入點，迸一步了解FK506否可通過減輕糖尿病大鼠足細(xì)胞損傷來降低尿蛋白排泄率，并探討其可能機(jī)制.
　　 目的:研究FK506對糖尿病大

5、鼠腎小球足細(xì)胞損傷的保護(hù)機(jī)制。
　　 方法:將38只正常雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組（N組）8只，糖尿病腎病組(DN)10只，F(xiàn)K506治療組(F)10只，洛汀新治療組(L)10只，其中DN組、F組、L組應(yīng)用鏈脲佐菌素(STZ)60mg/kg腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。F組成模4周后給予FK5061mg/kg/d灌胃，L組成模4周后給予洛汀新10mg/kg/d灌胃，DN組與N組4周后給予等量蒸餾水灌胃，每4周監(jiān)測各組大鼠血糖(

6、BS)、體重(BW)，藥物干預(yù)8周后測定各組大鼠的血肌酐(scr)、尿素氮(BUN)、腎重/體重(KW/BW)、24尿蛋白定量，光鏡、電鏡下觀察腎臟病理組織學(xué)改變，并應(yīng)用Westernblotting印跡檢測足細(xì)胞特異標(biāo)記物Nephrin的表達(dá)。
　　 結(jié)果:(1)與N組相比，DN組大鼠BS、SCr、BUN、KW/BW、24h尿蛋白定量均顯著上升(P＜0.05);與DN組相比，F(xiàn)組和L組上述指標(biāo)除血糖外均明顯降低(P＜0.05)

7、，且二組之間無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 (2)光鏡下，腎組織病理學(xué)觀察N組無明顯異常,DN組可見明顯的腎小球體積增大，腎小球系膜細(xì)胞增生，系膜區(qū)增寬，基底膜增厚;F組、L組較DN組上述病理改變指標(biāo)明顯減輕(P＜0.05)，且二組之間病理改變無明顯差別(P＞0.05)。
　　 (3)電鏡下，DN組腎小球基底膜顯著增寬，足突排列紊亂，足突增寬、融合，F(xiàn)組、L組較DN組基底膜及足突病變明顯減輕，二組之間上述病理改變無