SiRNA抑制EGFR基因表達對食管鱗癌細胞株Eca109放射敏感性的影響.pdf

1、目的：探討用小干擾RNA（siRNA）抑制EGFR基因表達以提高食管鱗癌細胞Eca109的放射敏感性。
　　方法：化學(xué)合成3種序列EGFR siRNA(EGFR siRNA1、EGFR siRNA2、EGFR siRNA3)，設(shè)隨機序列陽性SiRNA組、隨機序列陰性siRNA組、空白對照組，通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)入 Eca109細胞。以 CCK8法檢測細胞增殖，采用 RT-PCR和Western blot檢測干擾前后的食管癌Eca10

2、9細胞EGFRmRNA和蛋白表達。用細胞克隆形成實驗分析EGFR siRNA聯(lián)合X線照射對Eca109細胞的放射敏感性影響。
　　結(jié)果：EGFR siRNA1、EGFR siRNA2、EGFR siRNA3轉(zhuǎn)染Eca109細胞后的EGFR mRN A的陽性表達率為26.74％、9.52%、4.61%，較空白對照組的42.44%明顯下降（p<0.0001），EGFR siRNA3對Eca109細胞EGFR mRNA表達抑制率可高達8

3、5%；EGFR siRNA1、EGFR siRNA2、EGFR siRNA3轉(zhuǎn)染后Eca109細胞后的EGFR蛋白的陽性表達率為24.05%、34.91%、34.14%，較空白對照組的78.57%明顯下降（p<0.0001），EGFR siRNA1對 Eca109細胞 EGFR蛋白表達抑制效率可高達72.84%；CCK8實驗顯示siRNA3干擾EGFR后Eca109細胞生長受到抑制，增殖抑制率為28.2％；成克隆分析的 EGFR siR