香豆素衍生物瑞香素對(duì)HT22細(xì)胞中谷氨酸毒性損傷及腦缺血損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、第一部分瑞香素(Daphnetin)對(duì)小鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注損傷及新生大鼠缺氧缺血性損傷的保護(hù)作用
　　目的:觀察瑞香素(Daphnetin, DAP)對(duì)小鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注損傷及新生大鼠缺氧缺血性損傷是否具有保護(hù)作用。
　　方法:將雄性ICR小鼠及新生SD大鼠隨機(jī)分為安慰劑(sham)組、安慰劑+DAP組、安慰劑+缺血再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)(or缺氧缺血(hypoxia/isch

2、emia, H/I))組和DAP+I/R(or H/I)組,建立小鼠短暫大腦中動(dòng)脈阻塞(transient middle cerebral artery occlusion, tMCAO)模型及新生大鼠缺氧缺血(H/I)模型,觀察DAP的處理對(duì)小鼠腦梗死體積、神經(jīng)行為功能及對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦梗死的影響。
　　結(jié)果:與對(duì)照組相比,經(jīng)DAP處理后小鼠的腦梗死體積明顯減小,神經(jīng)行為功能明顯增強(qiáng)(P<0.05)。缺血再灌注前側(cè)腦室預(yù)給

3、予 DAP(1mg/kg),腦梗死體積減小了24.6％;神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。同樣,缺血再灌注后不同時(shí)間段分別予以腹腔注入DAP(10mg/kg),與對(duì)照組相比,經(jīng)DAP預(yù)處理后的新生大鼠的腦梗死體積明顯縮小,甚至缺血4小時(shí)后給藥仍有保護(hù)作用(P<0.05)。
　　結(jié)論:使用DAP干預(yù)小鼠tMCAO模型及新生大鼠H/I模型,小鼠的腦梗死體積明顯減小,神經(jīng)行為功能缺損明顯減輕;新生大鼠的腦梗死體積明顯減少

4、。這些結(jié)果均提示DAP對(duì)于小鼠tMCAO及新生大鼠H/I誘導(dǎo)的腦缺血損傷具有神經(jīng)保護(hù)作用。
　　第二部分瑞香素(Daphnetin)對(duì)HT22細(xì)胞中谷氨酸毒性損傷的保護(hù)作用的相關(guān)機(jī)制
　　目的:研究瑞香素(Daphnetin, DAP)對(duì)HT22細(xì)胞中谷氨酸毒性的保護(hù)及對(duì)谷胱甘肽(Glutathione, GSH)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的影響。探討DAP神經(jīng)保護(hù)作用的相關(guān)機(jī)制。

5、
　　方法:將HT22細(xì)胞培養(yǎng)過夜,后加入5mmol/L谷氨酸制作神經(jīng)元損傷模型組。培養(yǎng)基中加入不同濃度的DAP與培養(yǎng)基的混合液共同孵育12小時(shí),后在顯微鏡下分別觀察各組神經(jīng)元形態(tài)變化;采用 MTS法檢測細(xì)胞活力;測定細(xì)胞內(nèi) GSH含量及SOD活力的變化。
　　結(jié)果:DAP能有效地提高HT22細(xì)胞的存活率,其最佳保護(hù)濃度是100μmol/L。以5mmol/L谷氨酸作用于培養(yǎng) HT22細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)表現(xiàn)為突起減少。應(yīng)用 DAP