牙周及種植體周齦溝液中EMMPRIN及其配體CyPA的表達(dá).pdf

1、目的：EMMPRIN及其配體CyPA協(xié)同作用，參與炎癥過(guò)程，促進(jìn)炎癥反應(yīng)。由于兩者的表達(dá)發(fā)生于炎癥導(dǎo)致組織降解之前，故兩者作為檢測(cè)指標(biāo)早期發(fā)現(xiàn)炎癥發(fā)生成為可能，有利于炎癥的早期診斷、早期預(yù)防和早期治療。因此，本研究擬通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)對(duì)whatman3MM層析濾紙和whatman3＃定性濾紙?jiān)邶l溝液收集及蛋白萃取等方面的性能進(jìn)行比較，為后續(xù)研究選擇合適的采樣材料；檢測(cè)慢性牙周炎患者的齦溝液中EMMPRIN及其配體CyPA的表達(dá)，探索兩者與牙周

2、炎癥的關(guān)系；對(duì)種植體功能負(fù)載1年以上的患者進(jìn)行橫斷面研究，檢測(cè)種植體周齦溝液中EMMPRIN及其配體CyPA的表達(dá)，為今后探索兩者在種植體周?chē)装l(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用與機(jī)理提供依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.利用whatman3MM層析濾紙（A組）和whatman3＃定性濾紙（B組）以及15個(gè)遞增體積的血清品紅溶液，分析溶液浸潤(rùn)長(zhǎng)度與溶液體積的關(guān)系，并比較兩種濾紙?jiān)谑占l溝液方面的差異；使用相同濃度、不同體積的正常人血清以

3、及相同體積、不同濃度的正常人血清溶液，比較兩種濾紙蛋白萃取性能的差異。
　　 2.收集慢性牙周炎患者（牙周炎組）以及無(wú)缺牙、無(wú)牙周炎患者（對(duì)照組）的天然牙齦溝液，并進(jìn)行相關(guān)臨床檢查，ELISA法檢測(cè)齦溝液中EMMPRIN及其配體CyPA的表達(dá)，分析兩者的表達(dá)與牙周炎癥的關(guān)系，比較兩組差異。
　　 3.收集接受種植義齒修復(fù)且種植體行使功能1年以上的患者（種植組）的種植體周齦溝液，并進(jìn)行相關(guān)臨床檢查，ELISA法檢測(cè)齦溝液中

4、EMMPRIN及其配體CyPA的表達(dá)，分析兩者的表達(dá)與各臨床檢查指標(biāo)之間的關(guān)系，比較兩組間的差異。
　　 4.應(yīng)用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。溶液浸潤(rùn)長(zhǎng)度與溶液體積的關(guān)系采用線性回歸分析；EMMPRIN及CyPA的表達(dá)與各臨床指標(biāo)之間的相關(guān)性用Spearman秩相關(guān)分析；組間差異采用方差分析。P<0.05為差異有顯著性。
　　 結(jié)果：
　　 1.兩組濾紙條中溶液浸潤(rùn)長(zhǎng)度與溶液體積均成良好線性關(guān)系；兩組

5、溶液浸潤(rùn)長(zhǎng)度有顯著性差異（P<0.05），溶液體積為0.1μL時(shí)，溶液平均浸潤(rùn)長(zhǎng)度AB。當(dāng)使用相同濃度、不同體積的正常人血清時(shí)，兩組的萃取液總蛋白濃度無(wú)顯著性差異（P>0.05）；當(dāng)使用相同體積、不同濃度的正常人血清溶液時(shí)，兩組的萃取液總蛋白濃度的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　 2.牙周炎組中，GCF總量與EMMPRIN總量、CyPA總量以及GI、SBI、AL呈顯著正相關(guān)；EMMPRIN總量與GC

6、F總量、CyPA總量以及GI、SBI、AL呈顯著正相關(guān)，與吸煙情況呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）；CyPA總量與GCF總量、EMMPRIN總量以及GI、SBI、AL呈顯著正相關(guān)。對(duì)照組中，GCF總量、EMMPRIN總量及CyPA總量三者中兩兩間均呈現(xiàn)顯著正相關(guān)。在牙周炎組與對(duì)照組之間，GCF總量、EMMPRIN總量及CyPA總量的組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　 3.種植組中，PICF總量與EMMPRIN總量、CyPA

7、總量顯著正相關(guān)；EMMPRIN總量與PICF總量、CyPA總量、GI及mPLI成顯著正相關(guān)；CyPA總量與PICF總量、EMMPRIN總量以及GI呈現(xiàn)顯著正相關(guān)。在種植組與對(duì)照組之間，PICF/GCF總量、EMMPRIN總量、CyPA總量均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.whatman3MM層析濾紙和whatman3＃定性濾紙均可使用檢測(cè)齦溝液在濾紙條上的遷移距離的方法進(jìn)行齦溝液定量。當(dāng)單位時(shí)間內(nèi)

8、齦溝液的分泌量較大時(shí)，whatman3＃定性濾紙較3MM層析濾紙更為適用。在蛋白萃取性能方面，本研究結(jié)果顯示，兩者無(wú)顯著差異。由于后續(xù)研究中牙周炎患者的齦溝液分泌量可能較大，因此后續(xù)研究選用whatman3＃定性濾紙作為采樣材料。
　　 2.EMMPRIN及其配體CyPA在牙周健康的患者、慢性牙周炎患者的齦溝液以及接受種植義齒修復(fù)且種植體行使功能1年以上的患者的種植體周齦溝液中均有表達(dá)，且兩者表達(dá)呈顯著正相關(guān)，即兩者表達(dá)具有協(xié)同