肝組織工程用甘草次酸修飾殼聚糖硫酸酯酶交聯(lián)水凝膠支架材料的制備及性能研究.pdf

1、體外制備一種可移植的人工肝臟的肝組織工程，為惡性肝病的治療帶來了希望。肝組織工程的主要問題一是用于肝組織工程的支架要能誘導(dǎo)體內(nèi)的血管新生，為新生的肝組織提供足夠的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，一是要能為肝細(xì)胞提供一個(gè)良好的生長環(huán)境，保證新生肝組織具有正常的肝功能。因此，本文從提高支架誘導(dǎo)血管新生能力和提高支架的肝細(xì)胞親和性兩方面出發(fā)，制備了一種含有對(duì)細(xì)胞有特異性結(jié)合性的甘草次酸(GA)的肝組織工程支架材料。
　　 首先通過共價(jià)修飾制備了甘草次

2、酸修飾的殼聚糖硫酸酯(SCTS-GA)、可酶交聯(lián)的對(duì)羥基苯丙酸修飾的殼聚糖硫酸酯(SCTS-HPA)，制備了殼聚糖(CTS)、羧甲基殼聚糖(CMCTS)、殼聚糖硫酸酯(SCTS)、SCTS-GA修飾的玻璃片材料，并在辣根過氧化物酶/過氧化氫(HRP/H2O2)存在制備了凝膠性能簡單可調(diào)的酶交聯(lián)水凝膠。
　　 為了考察SCTS-GA材料的誘導(dǎo)血管新生能力，我們體外研究了人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)在CTS、CMCTS、SCTS、

3、SCTS-GA上的粘附和增殖行為，發(fā)現(xiàn)SCTS有更好的細(xì)胞親和性，并且GA的引入對(duì)增強(qiáng)了HUVEC粘附和增殖能力。體內(nèi)研究了CTS、CMCTS、SCTS、SCTS-GA支架誘導(dǎo)血管新生的能力，結(jié)果顯示SCTS能很好的誘導(dǎo)組織長入和血管新生，并且GA的引入對(duì)SCTS支架的誘導(dǎo)血管新生能力有一定的加強(qiáng)作用。與此同時(shí)，發(fā)現(xiàn)CTS、CMCTS支架在實(shí)驗(yàn)過程中因支架凝血造成了支架植入部位的皮膚壞死，經(jīng)過分析我們發(fā)現(xiàn)具有抗凝血特性的SCTS可通過抑

4、制血小板粘附表達(dá)抗凝血特性，從而保證了血管支架材料的安全性。
　　 為了考察SCTS-GA作為肝組織工程支架材料的可行性，我們首先以易得的HepG2細(xì)胞考察了SCTS-GA對(duì)HepG2細(xì)胞的粘附和增殖行為的影響，結(jié)果顯示含有GA的材料表現(xiàn)出了良好的細(xì)胞親和特性。然后，我們制備了含有GA的多孔支架材料SCTS-GA，考察了支架中GA對(duì)原代鼠肝細(xì)胞功能的維持和球體形成的影響，結(jié)果顯示，含有GA的支架材明顯的促進(jìn)了細(xì)胞的白蛋白、尿素的