喉鱗癌中Twist、E-cadherin和N-cadherin基因表達及相關研究.pdf

1、目的:喉鱗狀細胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)是耳鼻咽喉-頭頸外科常見的惡性腫瘤之一,近年來發(fā)病率有日益增多的趨勢。LSCC的發(fā)生和其他惡性腫瘤一樣,可能和多因素引起相關基因表達水平的改變有關。扭曲基因(Twist)蛋白是屬于堿性的螺旋-環(huán)-螺旋蛋白家族中的高度保守的轉(zhuǎn)錄因子,在胚胎的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。Twist作為上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)變(Epithelial-mesenchymal t

2、ransition,EMT)過程中的關鍵調(diào)控因子,對腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移有重要影響。本研究探討了喉鱗癌組織中扭曲基因(Twist)、E-鈣粘附素(E-cadherin)和N-鈣粘附素(N-cadherin)的表達,進一步了解三者在喉鱗癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移中的作用及三者之間的相互關系。
　　 方法:
　　 1應用免疫組織化學(immunohistochemistry,IHC)法檢測49例喉鱗癌及20例癌旁組織中Twist、

3、E-cadherin和N-cadherin基因的蛋白表達情況。
　　 2應用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(RT-PCR)檢測49例喉鱗癌及20例癌旁組織中Twist、E-cadherin和N-cadherin的mRNA表達情況。
　　 3統(tǒng)計學處理:應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。以P≤0.05為差異在統(tǒng)計學上有顯著意義,以P≤0.01為差異在統(tǒng)計學上有非常顯著意義
　　 結果:
　　 1 Twi

4、st的表達及其與臨床參數(shù)之間的關系
　　 1.1:應用免疫組化法檢測49例喉鱗癌組織和20例癌旁組織中Twist蛋白表達情況,陽性表達率分別為61.22％(30/49)和25.00％(5/20),二者差異統(tǒng)計學上具有非常顯著性意義(P＜0.01),Twist在喉鱗癌組織中的蛋白表達明顯高于癌旁組織。在喉鱗癌中Twist的蛋白表達與淋巴結轉(zhuǎn)移(N+組高于No組,P＜0.05)、臨床分期(Ⅲ、Ⅳ期高于Ⅰ、Ⅱ期,P＜0.01)相關,而

5、與腫瘤病理學分級、臨床分型及年齡分組無關(P＞0.05)。1.2應用RT-PCR法檢測49例喉鱗癌組織和20例癌旁組織中Twist mRNA的表達情況,其相對表達量分別為(0.93±0.39)和(0.57±0.24),兩者差異在統(tǒng)計學上有非常顯著性意義(P＜0.01),Twist在喉鱗癌組織中的mRNA表達明顯高于癌旁組織;在喉鱗癌中Twig mRNA的表達與淋巴結轉(zhuǎn)移(N+組高于No組,P＜0.05)、臨床分期(Ⅲ、Ⅳ期高于Ⅰ、Ⅱ期,

6、P＜0.01)相關,而與腫瘤病理學分級、臨床分型及年齡分組無關(P＞0.05)。
　　 2 E-cadherin的表達及其與臨床參數(shù)之間的關系
　　 2.1應用免疫組化法檢測49例喉鱗癌組織和20例癌旁組織中的E-cadherin蛋白表達情況,陽性表達率分別為51.02％(25/49)和100.00％(20/20),二者差異在統(tǒng)計學上有非常顯著性意義(P＜0.01),E-cadherin在喉鱗癌組織中的蛋白表達明顯低于癌

7、旁組織;在喉癌中E-cadherin的表達與腫瘤病理學分級(G1、G2組高于G3組,P＜0.05)、淋巴結轉(zhuǎn)移(No組高于N+組,P＜0.01)和臨床分期(Ⅰ、Ⅱ期高于Ⅲ、Ⅳ期,P＜0.01)相關,而與臨床分型及年齡分組無關(P＞0.05)。
　　 2.2應用RT-PCR法檢測49例喉鱗癌組織和20例癌旁組織中的E-cadherinmRNA的表達情況,其相對表達量分別為(0.64±0.30)和(0.93±0.33),前者明顯低于

8、后者,二者差異在統(tǒng)計學上有非常顯著性意義(P＜0.01)。E-cadherin在喉鱗癌組織中的mRNA表達明顯低于癌旁組織;在喉鱗癌中E-cadherin的mRNA表達與腫瘤病理學分級(G1、G2組高于G3組,P＜0.01)、淋巴結轉(zhuǎn)移(No組高于N+組,P＜0.01)和臨床分期(Ⅰ、Ⅱ期高于Ⅲ、Ⅳ期,P＜0.05)相關,而與臨床分型及年齡分組無關(P＞0.05)。
　　 3 N-cadherin的表達及其與臨床參數(shù)之間的關系<

9、br>　　 3.1應用免疫組化法檢測49例喉鱗癌組織和20例癌旁組織中的N-cadherin蛋白表達情況,陽性表達率分別為73.47％(36/49)和40.00％(8/20),二者差異具有顯著性意義(P＜0.05),N-cadherin在喉鱗癌組織中的蛋白表達明顯高于癌旁組織;在喉鱗癌中N-cadherin蛋白表達與淋巴結轉(zhuǎn)移(N+組高于No組,P＜0.05)、臨床分期(Ⅲ、Ⅳ期高于Ⅰ、Ⅱ期,P＜0.01)及年齡分組(≤60歲組高于＞

10、60歲組,P＜0.05)相關,而與腫瘤病理學分級及臨床分型分組無關(P＞0.05)。
　　 3.2應用RT-PCR法檢測49例喉鱗癌組織和20例癌旁組織中的N-cadherinmRNA的表達情況,其相對表達量分別為(0.70±0.21)和(0.36±0.11),二者差異在統(tǒng)計學上有非常顯著性意義(P＜0.01)。N-cadherin在喉鱗癌組織中的mRNA表達明顯高于癌旁組織;在喉鱗癌中N-cadherin的mRNA表達與淋巴結

11、轉(zhuǎn)移(N+組高于N0組,P＜0.05)、臨床分期(Ⅲ、Ⅳ期高于Ⅰ、Ⅱ期,P＜0.01)相關,而與腫瘤病理學分級、臨床分型、年齡分組無關(P＞0.05)。
　　 4三種基因mRNA及蛋白表達相關性:在mRNA水平及蛋白水平,Twist與E-cadherin(r=-0.760,P＜0.01;r=-0.662,P＜0.01),N-cadherin與E-cadherin(r=-0.615,P＜0.01;r=-0.558,P＜0.01)的

12、表達均呈負相關;Twist與N-cadherin均呈正相關(r=0.850,P＜0.01;r=0.649,P＜0.01)。
　　 結論:
　　 1喉鱗癌中,Twist和N-cadherin基因mRNA及蛋白水平均呈高表達,E-cadherin均呈低表達,提示三者可能與喉癌的發(fā)生相關。
　　 2喉鱗癌中Twist和N-cadherin的高表達和E-cadherin的低表達與淋巴結轉(zhuǎn)移、臨床分期等喉癌惡性生物學行為相