黑紫橐吾和蒙古蒲公英的化學(xué)成分研究及臭靈丹中異綠原酸的色譜制備研究.pdf

1、本論文對三種民間的藥用菊科植物：橐吾屬植物黑紫橐吾(Ligulariaatroviolacea (Franch) Hand-Mazz)、蒲公英屬植物蒙古蒲公英(Taraxacummongolicum Hand-Mazz)和六棱菊屬植物臭靈丹Laggera pterodonta (DC.)Benth]進(jìn)行了研究，全文有以下四個部分組成。 第一章黑紫橐吾的化學(xué)成分及部分化合物的抗乙型肝炎病毒活性研究 本論文采用常規(guī)的柱層析、

2、制備薄層層析、重結(jié)晶等分離手段對植物中的提取物進(jìn)行了分離純化，并利用現(xiàn)代波譜方法(1H-NMR,13C-NMR,1H-1H COSY，NOESY,HMBC，HSQC，ESI-MS，HR-MS，UV,IR,X-ray等)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，確定了化學(xué)結(jié)構(gòu)。主要的實驗結(jié)果如下： 一、從黑紫橐吾(Ligularia atroviolacea)中共分離得到32個單體化合物，鑒定了24個化合物，其中化合物(I-2-lI-10)為新化合物，化合物

3、(I-11)為首次以天然產(chǎn)物的形式分得，其它化合物均為首次從該植物中分離得到： 1.8β-氫-艾里莫芬烷-3.7(11)-二烯-12,8α；15,6α-二內(nèi)酯(I-1)； 2.8β-羥基-艾里莫芬烷-3,7(11)-二烯-12，8α15，6α-二內(nèi)酯(I-2)； 3.8-甲氧基-艾里莫芬烷-3,7(11)-二烯-12,8α,15，6α-二內(nèi)酯(I-3)； 4.艾里莫芬烷-3，7(11)，8-三烯-12,8

4、α15，6α-二內(nèi)酯(I-4)； 5.3β良當(dāng)歸?；?艾里-芬烷-7(11)-烯-12,8β-內(nèi)酯-15-酸(I-5)； 6.1α氯-6β-異丁?；?9-酮-10β-羥基-呋喃雅檻藍(lán)烷(I-6)； 7.10β-氫-8-酮-艾里莫芬烷-3(4)，6(7)-二烯-12，15-二酸(I-7)； 8.10α-氫-8-酮-艾里莫芬烷-3(4)，6(7)-二烯-12，15-二酸(I-8)； 9.8β-[艾里莫

5、芬烷-3'，7'(11')-二烯-12'，8'α5',6'α-二內(nèi)酯]-艾里莫芬烷-二烯-12，8α15，6α-3，7(11)-二內(nèi)酯(I-9)； 10.黑紫橐吾A(I-10)； 11.呋喃雅檻藍(lán)烷-3-烯-15，6α-內(nèi)酯(I-11)； 12.呋喃雅檻藍(lán)烷-15β,6α-內(nèi)酯(I-12)； 13.1α-羥基-6β-異丁?；?9-酮-10β-氫-呋喃雅檻藍(lán)烷(I-13)； 14.1α-基-6β-異丁酰基-

6、9-酮-10α-氫-呋喃雅檻藍(lán)烷(I-14)； 15.1α10β-二羥基-6β-當(dāng)歸?；?9-酮-呋喃雅檻藍(lán)烷(I-15)； 16.8β-羥基-艾里莫芬烷-7(11)-烯-12，8α15，6a-二酯(I-16)； 17.3β-當(dāng)歸?；?8β-氫-艾里莫芬烷-7(11)-烯-12，8α14β,6a-二酯（I-17)； 18.3β-(2'-甲基丁酰基)-8β-氫-艾里莫芬烷-7(11)-烯-12，8α，14β

7、，6α-二內(nèi)酯 (I-18)； 19.β-谷甾醇（I-19)； 20.豆甾醇（I-20)； 21.豆甾-4-烯-3β醇(I-21)； 22.胡蘿卜苷(I-22)； 23.6-O-乙酰氧基-α-D-吡喃葡萄糖(I-23)； 24.正二十六烷酸(I-24) 以上共計艾里莫芬烷類倍半萜18個，甾醇類化合物4個，糖類衍生物1個，長鏈脂肪烴1個。通過X-ray單晶衍射技術(shù)確定了化合物(I-1

8、)和(I-6)的結(jié)構(gòu)。 二、黑紫橐吾的主要次生代謝產(chǎn)物為艾里莫芬烷類倍半萜。 三、根據(jù)抗乙型肝炎病毒活性實驗，化合物(I-1)、(I-2)、(I-3)和(I-4)能顯著抑制HBsAg的表達(dá)。 第二章蒲公英的化學(xué)成分及抗病毒活性研究 蒲公英(Herba Taraxaci)為我國常用中藥材，種類繁多，資源豐富。為了進(jìn)一步闡明蒲公英的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本研究對蒙古蒲公英進(jìn)行了系統(tǒng)的植物化學(xué)研究。從中分離得到44個單

9、體化合物，鑒定了其中的40個化合物的結(jié)構(gòu)，其中4個為新化合物(II-14～I(xiàn)I-15和II-32～I(xiàn)I-33)，16個為首次從本屬植物中分離得到的化合物(II-1，II-3，II-6～I(xiàn)I-13，II-16，II-20～I(xiàn)I-22，II-3l和II-34)，13個化合物(II-18，II-23～I(xiàn)I-30和II-35～I(xiàn)I-38)為首次從該植物中分得，且實驗中首次從該屬植物中分離鑒定出木脂素類化合物。 1.洋艾素(II-1)；

10、2.槲皮素(II-2)； 3.槲皮素-3’,4'，7-三甲醚(II-3)； 4.木犀草素(II-4)； 5.木犀草素-7-O-β-伊D-葡萄糖苷(II-5)； 6.木犀草素-7-O-β-D-半乳糖苷(II-6)； 7.芫花素(II-7)； 8.Isoetin(II-8)； 9.3',5，7-三羥基-4'-甲氧基-二氫黃酮(II-9); 10.芫花素-4'-O-β-D-蘆丁糖

11、苷(II-10)； 11.橙皮苷(II-11)； 12.槲皮素-7-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷](II-12)； 13.槲皮素-3，7-O-β-D-二吡喃葡萄糖苷(II-13)； 14.Isoctin-7一O-β-D-glucopyranosy1-2'-O-α-L-arabinopyranoside(II-14)； 15.Isoetin-7-O-β-D-glucop

12、yranosy1-2'-O-α-D-glucopyranoside(II-15)； 16.Isoetin-7一O-β-D-glucopyranosy1-2'-O-β-D-xyloypyranoside(II-16)； 17，咖啡酸(II-17)； 18.阿魏酸(II-18)； 19.綠原酸(II-19)： 20.3,5-O-雙咖啡?；崴?II-20)； 21.3.4-O-雙咖啡酰基奎尼

13、酸(II-21)； 22.4,5-O-雙咖啡酰基奎尼酸(II-22)； 23.1-羥甲基-5-羥基-苯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(II-23)； 24.對羥基苯甲酸(II-24); 25.對香豆酸(II-25)； 26.3,5一二羥基苯甲酸(II-26)； 27.沒食子酸(II-27)； 28.沒食子酸甲酯(II-28)； 29.丁香酸(II-29)； 30.七

14、葉內(nèi)酯(II-30)； 31.Refeseidrine(II-31)； 32.蒙古蒲公英A(II-32)； 33.蒙古蒲公英B(II-33)； 34.Isodonsesquitin A(II-34)； 35.蒲公英甾醇乙酸酯(II-35)； 36.偽蒲公英甾醇乙酸酯(II-36)； 37.羽扇豆醇乙酸酯(II-37)； 38.正十六烷酸(II-38) 另外，從石油醚

15、部位分得大量的豆甾醇和β-谷甾醇(II-39和II-40)。 以上可以看出，蒲公英的次生代謝產(chǎn)物主要是黃酮類和酚酸類化合物。根據(jù)抗病毒活性實驗結(jié)果表明：酚酸中的異綠原酸類化合物體外對單純皰疹病毒和甲型人流感病毒均有較強(qiáng)的抑制作用。 第三章臭靈丹中異綠原酸的色譜制備研究 臭靈丹（Laggera pterodonta)具有顯著的抗菌消炎之功效，在我國云南具有豐富的植物資源，極具開發(fā)價值。經(jīng)研究，熱水提醇沉法制備的臭靈

16、丹提取物主要成分為異綠原酸類化合物。且從第二章可以看出，異綠原酸類化合物具有較強(qiáng)的抗病毒活性。由于三個主要的異綠原酸類化合物結(jié)構(gòu)相似，難于分離，為了進(jìn)一步研究的需要，我們研究了它們的色譜分離制備行為。本文立足于藥效實際，從臭靈丹原料出發(fā)，采用高效液相色譜分離純化出可用于新藥開發(fā)的三個活性化合物，走出了一條對臭靈丹進(jìn)行精深加工和綜合開發(fā)的新工藝路線。主要內(nèi)容如下： 1.對臭靈丹的活性成分進(jìn)行分析方法研究。提出了臭靈丹中三種主要異綠原酸類化

17、合物的高效液相色譜(RP-HPLC)的同時分析方法，適用于原材料及產(chǎn)品的質(zhì)量控制，快速、準(zhǔn)確。 2.運用高效液相色譜制備技術(shù)，實現(xiàn)了多酚類混合物中三種主要活性成分3,4-O-雙咖啡?；崴幔?,5-O-雙咖啡?；崴岷?,5-O-雙咖啡?；崴岬耐椒蛛x，提出了一條在制備流程中同時得到三種高純產(chǎn)品的新工藝路線，實驗中對色譜填料、流動相組成、流速、進(jìn)樣量等工藝參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，得出制備型液相色譜分離純化異綠原酸的最佳色譜條件如