苦瓜的抑菌作用及其活性物質(zhì)的提取分離研究.pdf

1、苦瓜作為一種傳統(tǒng)的蔬菜和中藥,具有藥膳同源之功效.該文對苦瓜提取物的抑菌活性進(jìn)行研究,包括抑菌譜及最低抑菌濃度的確定;通過比較大群體量苦瓜品種抑菌活性的差異,篩選出抑菌活性最強的品種,以其為原料,優(yōu)化抑菌活性物質(zhì)的提取工藝;探討提取物的穩(wěn)定性,并進(jìn)一步對抑菌活性物質(zhì)進(jìn)行分離純化和成分粗測.主要結(jié)果如下:1.試驗確定了苦瓜提取物的抑菌譜,證明苦瓜提取物對細(xì)菌有良好的抑制作用,特別是對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的抑制作用最顯著,并測得其對細(xì)菌

2、的最低抑菌濃度均低達(dá)37.5mg/mL,其中對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌最低抑菌濃度低至18.75mg/ml.因此,選取金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為該試驗的指示菌.2.選用25個不同品種苦瓜,采用擴散法比較它們之間的抑菌活性.結(jié)果表明,不同類型的苦瓜品種的抑菌活性差異顯著(P<0.01),總體趨勢是油瓜類抑菌活性最強,大頂類次之,白苦瓜類最小.同一個品種的苦瓜,其不同生育期的抑菌活性差異極顯著(P<0.01),其中生長期達(dá)到商品成熟期時的抑

3、菌活性最強,生長初期和超過商品成熟期時,抑菌活性明顯下降.快速聚類法把25個苦瓜品種聚成4大類群,其抑菌活性的優(yōu)劣順序為第1類>第2類>第4類>第3類.3.苦瓜原料的預(yù)處理不同,其抑菌活性有一定的差異,以苦瓜干粉提取物的抑菌活性最好.苦瓜提取物的抑菌活性隨著溶劑極性的增大而增強,其中以70%的乙醇提取物的活性最大.在單因素實驗的基礎(chǔ)上,采用RSA法試驗設(shè)計,優(yōu)化出最佳提取條件為:乙醇濃度65%(V/V)、提取溫度60℃、料液比(W:V)

4、1:40.在此最優(yōu)工藝條件下,苦瓜提取物的抑菌圈直徑為12.39mm,一次浸提率為38.4%4.以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌為指示菌,研究苦瓜提取物活性物質(zhì)的穩(wěn)定性.結(jié)果表明,提取物的抑菌活性具有較好的熱穩(wěn)定性,對紫外光照射穩(wěn)定,在中性和偏酸性及低于0.5mol/L的NaCL條件下的抑菌效果較佳.成分粗測結(jié)果表明,苦瓜提取物中含有黃酮類、生物堿、酚類、有機酸及皂甙類等成分,而不含有蒽醌及其甙類.苦瓜提取物具有較強的總抗氧化效果,并且其抗氧

5、化能力與其抑菌活性具有一定的相關(guān)性.5.按極性將苦瓜提取物分為石油醚部、二氯甲烷部、乙酸乙酯部、正丁醇部和水部等不同極性溶劑萃取物,經(jīng)抑菌活性比較,確定乙酸乙酯部的抑菌活性最強,正丁醇部次之.乙酸乙酯部和正丁醇部經(jīng)薄層層析進(jìn)一步純化,2h展開效果最好.展開后得到6個組分,其中三個組分可能屬于黃酮類物質(zhì).在硅膠板層析的基礎(chǔ)上,以金黃色葡萄球菌為指示菌,通過生物自顯影法檢測活性組分的抑菌性能,結(jié)果表明苦瓜提取物中至少含有5種具有抑菌活性的成