Galectin-3、MMP-9在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及相關(guān)性研究.pdf

1、目的：卵巢癌在女性生殖道常見惡性腫瘤中排第2位，其在婦科惡性腫瘤中死亡率卻是最高的。卵巢腫瘤的種類繁多，組織成分復(fù)雜，是全身各臟器原發(fā)腫瘤類型最多的，其包括上皮性腫瘤、生殖細(xì)胞腫瘤、性索間質(zhì)腫瘤和轉(zhuǎn)移性腫瘤，其中上皮性卵巢癌(Epithelial ovarian cancer，EOC)占卵巢惡性腫瘤的90％。卵巢癌早期無明顯癥狀，發(fā)病比較隱匿，患者不易察覺，大約70％卵巢癌患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已為晚期，經(jīng)過手術(shù)及化放療后，復(fù)發(fā)率仍很高，其5年生存

2、率僅為20％-30％。因此尋求一種特異的上皮性卵巢癌早期診斷指標(biāo)成為醫(yī)學(xué)研究中迫切需要解決的問題。
　　 Galectin-3是一種β-半乳糖苷結(jié)合蛋白，是半乳糖凝集素(Galectins)家族中的成員之一，Galectin-3具有多種生物學(xué)功能，它能調(diào)節(jié)細(xì)胞的黏附、促進(jìn)細(xì)胞的增殖、參與炎癥反應(yīng)及血管生成、參與免疫調(diào)節(jié)、并可促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移等?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)能降解細(xì)胞外基質(zhì)中多種蛋白成分，在惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中

3、起重要作用。
　　 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法測(cè)定Galectin-3和MMP-9在上皮性卵巢癌、交界性卵巢腫瘤及卵巢囊腺瘤中的表達(dá)，通過計(jì)算其在三種不同分化程度腫瘤中的陽性率，分別評(píng)估Galectin-3和MMP-9在上皮性卵巢癌、交界性卵巢腫瘤及卵巢囊腺瘤中的表達(dá)是否有意義；評(píng)估Galectin-3和MMP-9在不同組織分級(jí)和臨床分期的上皮性卵巢癌中的表達(dá)陽性率及其差異；并探討Galectin-3和MMP-9兩者在上皮性卵巢

4、癌中的相關(guān)性。為進(jìn)一步研究其在診斷卵巢上皮性腫瘤中的意義提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 1、標(biāo)本的選擇：選取接受手術(shù)治療的75例卵巢上皮性腫瘤新鮮組織標(biāo)本，常規(guī)經(jīng)10％福爾馬林液固定。術(shù)后均經(jīng)病理證實(shí)，其中卵巢囊腺瘤12例，交界性卵巢腫瘤18例，上皮性卵巢癌45例，且卵巢癌患者均未經(jīng)化療、放療等任何抗癌治療。
　　 2、Galectin-3和MMP-9兩種蛋白表達(dá)陽性判定方法：A項(xiàng)：按細(xì)胞染色有無及深淺對(duì)染色

5、強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)分：0分為無色，2分為黃色或深黃色，3分為褐或棕褐色；B項(xiàng)：按陽性細(xì)胞所占的百分比評(píng)分：0分為陰性，1分為陽性細(xì)胞≤10％，2分為11％-50％，3分為51％-75％，4分為≥75％。每例染色積分=兩種評(píng)分相乘(A×B)，積分≥3分為免疫反應(yīng)陽性。
　　 3、Galectin-3和MMP-9的測(cè)定：符合要求的標(biāo)本，經(jīng)石蠟包埋后，制成4μm切片，應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP二步法檢測(cè)各組織中Galectin-3和MMP-9的表達(dá)

6、情況，按照上述評(píng)分方法在光學(xué)顯微鏡下觀察陽性細(xì)胞，并計(jì)算其陽性表達(dá)例數(shù)。
　　 4、組織學(xué)分級(jí)和臨床分期：手術(shù)后病理學(xué)組織分級(jí)為Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)，即高分化、中分化和低分化。卵巢癌按FIGO國(guó)際分期法，Ⅰ期：腫瘤局限于卵巢。Ⅱ期為病變累及一側(cè)或雙側(cè)卵巢，伴盆腔轉(zhuǎn)移。Ⅲ期：腫瘤侵及一側(cè)或雙側(cè)卵巢，伴盆腔以外腹膜種植或腹膜后或腹股溝淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；肝臟表面轉(zhuǎn)移。Ⅳ期：腫瘤侵及一側(cè)或雙側(cè)卵巢并有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，胸水存在時(shí)需找到惡性細(xì)胞；肝轉(zhuǎn)移需累

7、及肝實(shí)質(zhì)。
　　 結(jié)果：
　　 1、Galectin-3、MMP-9主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)中，少數(shù)也表達(dá)于細(xì)胞核及細(xì)胞膜上。
　　 2、Galectin-3在卵巢囊腺瘤、交界性卵巢腫瘤及上皮性卵巢癌中的表達(dá)陽性率分別為16.77％、61.11％、88.89％，卵巢囊腺瘤同交界性卵巢腫瘤比較其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，卵巢囊腺瘤同上皮性卵巢癌比較其差異具有顯著性(P<0.05)。交界性卵巢腫瘤同上皮性卵

8、巢癌比較其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其在卵巢漿液性囊腺癌及粘液性囊腺癌中表達(dá)率分別為80.56％、66.67％，兩者比較其差異無顯著性(P>0.05)。
　　 3、MMP-9在卵巢囊腺瘤、交界性卵巢腫瘤及上皮性卵巢癌中的表達(dá)陽性率分別為25％、66.77％、82.22％，卵巢囊腺瘤同交界性卵巢腫瘤比較其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，卵巢囊腺瘤同上皮性卵巢癌比較其差異具有顯著性(P<0.05)。交界性卵巢腫瘤同上皮

9、性卵巢癌比較其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 4、將45例上皮性卵巢癌中的Galectin-3陽性表達(dá)按組織分級(jí)及臨床分期的不同進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，分化為Ⅲ級(jí)的陽性率明顯高于分化為Ⅰ級(jí)的，差異具有顯著性(P<0.05)。分化為Ⅰ級(jí)與分化為Ⅱ級(jí)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。分化經(jīng)級(jí)與分化Ⅲ級(jí)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Galectin-3在臨床分期為Ⅲ+Ⅳ期中的表達(dá)明顯高于Ⅰ期(P<0.05)，Ⅰ期同Ⅱ期、Ⅱ期同Ⅲ+Ⅳ期比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意

10、義。
　　 5、將45例上皮性卵巢癌中MMP-9的陽性表達(dá)情況按組織學(xué)分級(jí)和臨床分期進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，分化為Ⅲ級(jí)的陽性率明顯高于分化為Ⅰ級(jí)的，差異具有顯著性(P<0.05)。分化為Ⅰ級(jí)與分化為Ⅱ級(jí)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。分化Ⅱ級(jí)與分化Ⅲ級(jí)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MMP-9在臨床分期為Ⅲ+Ⅳ期中的表達(dá)明顯高于Ⅰ期(P<0.05)，Ⅰ期同Ⅱ期、Ⅱ期同Ⅲ+Ⅳ期比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 6、在45例上皮性卵巢癌患者的標(biāo)本中，其中有

11、20例標(biāo)本Galectin-3和MMP-9兩種蛋白表達(dá)均為陽性，通過繪制散點(diǎn)圖對(duì)其陽性細(xì)胞百分比分布進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)描述，經(jīng)線性相關(guān)對(duì)其分布進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，Galectin-3和MMP-9在上皮性卵巢癌的表達(dá)陽性率成直線相關(guān)，Pearson相關(guān)系數(shù)r=0.888。
　　 結(jié)論：
　　 1、Galectin-3和MMP-9的陽性例數(shù)同三種卵巢腫瘤的分化程度相關(guān)，隨腫瘤惡性程度的增加，其陽性表達(dá)率有逐漸上升的趨勢(shì)，其在上皮性卵巢癌