乙酰肝素酶、bFGF與乳腺癌MVD及轉(zhuǎn)移和預(yù)后的關(guān)系.pdf

1、乙酰肝素酶、bFGF與乳腺癌MVD及轉(zhuǎn)移和預(yù)后的關(guān)系 具有局部浸潤(rùn)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移能力是惡性腫瘤細(xì)胞特有的性質(zhì)，并且是惡性腫瘤威脅病人健康與生命的主要原因。腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的多步驟過程，其中腫瘤新生血管形成和腫瘤細(xì)胞突破由細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)和基底膜(BM)組成的屏障是腫瘤轉(zhuǎn)移中的兩個(gè)必經(jīng)過程。近來研究發(fā)現(xiàn)肝素酶(Hpa)不僅可以特異性地降解該屏障的主要成分之一一硫酸．乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)，還能協(xié)同多種生物因子(如bFG

2、F)促進(jìn)腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和血管生成的作用，為腫瘤轉(zhuǎn)移研究和尋找抗腫瘤新藥開辟了新的領(lǐng)域。 本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)乳腺癌組織中肝素酶及bFGF的表達(dá)情況進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，通過二者的表達(dá)情況及其與臨床病理因素和患者術(shù)后生存時(shí)間的關(guān)系進(jìn)行分析，研究在乳腺癌中二者的表達(dá)關(guān)系及與侵襲和轉(zhuǎn)移各因素間的關(guān)系，探討它們?cè)谌橄侔┭苌?、轉(zhuǎn)移及患者預(yù)后評(píng)估中的作用和意義。 材料與方法 1．材料 95例組織標(biāo)本全部來源于遼寧省腫瘤醫(yī)院

3、1995年1月-2000年9月間手術(shù)切除的乳腺癌組織石蠟包埋標(biāo)本，所有患者均為女性，術(shù)前未接受化療及放療，所有病例隨訪5年以上，臨床及病理資料完整。取20例癌旁正常乳腺組織作對(duì)照。 2．主要試劑和來源 實(shí)驗(yàn)藥品：濃縮型兔抗人Hpa多克隆抗體購于武漢博士德生物工程有限公司；兔抗人bFGF多克隆抗體、鼠抗人CD34單克隆抗體、即用型S-P超敏免疫組化(KIT-9710)、DAB顯色試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。

4、 3．方法 免疫組織化學(xué)染色：應(yīng)用鏈菌素抗生物素蛋白一過氧化物酶免疫組化法(S-P法)檢測(cè)肝素酶蛋白及bFGF的表達(dá)及腫瘤微血管密度(MVD)，用PBS代替一抗作陰性對(duì)照。結(jié)果判定：以細(xì)胞膜和/或細(xì)胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性顯色，以染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞比例評(píng)定陽性表達(dá)；在低倍視野下選取腫瘤微血管數(shù)量(CD34陽性)最豐富區(qū)域，在200倍視野范圍計(jì)5個(gè)視野的微血管數(shù)目，取平均值作為間質(zhì)微血管密度。 4．統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

5、 采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，采用t檢驗(yàn)、X<'2>檢驗(yàn)，0.01

6、FGF在成纖維細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞有不同程度的染色。 2．Hpa、bFGF表達(dá)與MVD的關(guān)系及Hpa、bFGF表達(dá)的關(guān)系 Hpa及bFGF陽性表達(dá)組IMVD值明顯高于Hpa及bFGF陰性表達(dá)組MVD值；二者共陽性表達(dá)組MVD值明顯高于共陰性表達(dá)組MVD值及單獨(dú)一種表達(dá)陽性組MVD值。相關(guān)性檢驗(yàn)結(jié)果表明：Hpa表達(dá)和bFGF表達(dá)呈正相關(guān)。 3 Hpa、bFGF表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系 對(duì)Hpa、bFGF

7、在乳腺癌組織中的表達(dá)情況與乳腺癌臨床病理特征的相互關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：乙酰肝素酶和bFGF的表達(dá)與乳腺癌腫瘤大小、組織學(xué)分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、5年生存率密切相關(guān)，與患者的年齡無關(guān)。 結(jié)論： 1．乙酰肝素酶和bFGF在乳腺癌中的表達(dá)明顯增高，且二者在表達(dá)上有高度的一致性。 2．肝素酶和bFGF的表達(dá)與乳腺癌腫瘤大小、組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期及5年生存率密切相關(guān)，與患者的年齡無關(guān)。 3．肝素酶和