β-發(fā)卡肽凝膠結(jié)構(gòu)和性能的調(diào)控及在細胞培養(yǎng)中的應用.pdf

1、分子自組裝是當前科學研究領域的熱點課題。多肽分子自組裝以其豐富的自組裝驅(qū)動力、新穎的聚集體形態(tài)、特殊的功能及良好的生物相容性,在納米技術、生物材料、藥物傳輸?shù)确矫婢哂袕V泛的應用前景。近年來,一些多肽序列陸續(xù)被報道,這些肽序列可以自組裝形成纖維、帶狀、管狀、球狀等納米結(jié)構(gòu),如Pochan等人報道的經(jīng)典β-發(fā)卡肽,可自組裝形成納米纖維支架。在本論文中,我們利用五種多肽來研究疏水性及β-發(fā)卡結(jié)構(gòu)對自組裝機理及其凝膠性能的影響,進而研究了其在細

2、胞培養(yǎng)方面的應用。本文中,我們描述了多肽在細胞培養(yǎng)液DMEM中的動態(tài)自組裝過程,并發(fā)現(xiàn)其自組裝凝膠作為生物支架的優(yōu)良性能。
　　 根據(jù)已報道的經(jīng)典β-發(fā)卡序列(VK)4VDppT(VK)4,我們采用固相合成法設計合成了(VK)2(IK)2VDPPT(KI)2(KV)2、(IK)2(VK)2VDPPT(KV)2(KI)2、(IK)4VDPPT(KI)4、(IK)9四種多肽,并通過質(zhì)譜分析其純度。除了(IK)9序列,其他四種多肽都是

3、由二十個氨基酸組成,并具有形成β-發(fā)卡的序列。通過圓二色譜發(fā)現(xiàn),加入DMEM后,五種多肽溶液(2％),其二級結(jié)構(gòu)都為β折疊;但通過TEM表征五種多肽的二級微觀結(jié)構(gòu)形貌,其中具有β-發(fā)卡序列的粗(3-5nm)且長得纖維分布致密,交聯(lián)成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),而無發(fā)卡結(jié)構(gòu)的(IK)9纖維則細(1nm左右)且短;借助流變儀,測定五種多肽形成凝膠的機械性能,發(fā)現(xiàn)β-發(fā)卡肽凝膠的機械性能明顯強于(IK)9,并且疏水性最強的(IK)4VDPPT(KI)4的凝膠強

4、度最大;并通過SEM表征了(VK)4VDPPT(VK)4、(IK)4VDPPT(KI)4、(IK)9凝膠的內(nèi)部微觀結(jié)構(gòu),為十納米左右孔徑的多孔性結(jié)構(gòu)。
　　 本文用(VK)4VDPPT(VK)4、(IK)4VDPPT(KI)4、(IK)9三種多肽凝膠,考察了疏水性及β-發(fā)卡在組織細胞培養(yǎng)方面影響。通過細胞雙染實驗和MTT實驗,證明了三種肽凝膠都擁有良好的細胞相容性,疏水性和β-發(fā)卡結(jié)構(gòu)對細胞培養(yǎng)無明顯影響。用(IK)4VDPPT