強(qiáng)力霉素對(duì)共培養(yǎng)骨關(guān)節(jié)炎軟骨-滑膜細(xì)胞的影響.pdf

1、[目的]
　　 通過共培養(yǎng)軟骨-滑膜細(xì)胞及用強(qiáng)力霉素進(jìn)行干預(yù)，探討骨關(guān)節(jié)炎病理過程中滑膜細(xì)胞對(duì)軟骨細(xì)胞的影響，探討強(qiáng)力霉素對(duì)共培養(yǎng)骨關(guān)節(jié)炎軟骨-滑膜細(xì)胞的作用，為臨床用藥提供了更多的理論基礎(chǔ)。
　　 [方法]
　　 1.采集SD大鼠(n=10)左膝前交叉韌帶切斷骨關(guān)節(jié)炎模型的膝關(guān)節(jié)軟骨和滑膜細(xì)胞，及正常(右膝)軟骨和滑膜細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)。選取各種細(xì)胞的第3-4代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分組：正常軟骨細(xì)胞(NC)+正常滑

2、膜細(xì)胞(NS)；正常軟骨細(xì)胞(NC)+骨關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞(OS)；骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞(CC)+正?；ぜ?xì)胞(NS)；骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞(OC)+骨關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞(OS)。共培養(yǎng)24小時(shí)后使用ELISA試劑盒檢測培養(yǎng)液中PGE2的含量，GRIESS法檢測NO的含量，利用Real-Time-PCR方法檢測軟骨細(xì)胞表達(dá)Ⅱ型膠原和蛋白多糖mRNA的表達(dá)。
　　 2.在骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞(OC)+骨關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞(OS)組加入不同濃度強(qiáng)力霉素進(jìn)行

3、干預(yù)。分組：強(qiáng)力霉素0μmol/L+(OS+OC)；強(qiáng)力霉素5μmol/L+(OS+OC)；強(qiáng)力霉素10μmol/L+(OS+OC)，強(qiáng)力霉素20μmol/L+(OS+OC)。檢測指標(biāo)和方法同上。
　　 [結(jié)果]
　　 1.在共培養(yǎng)滑膜和軟骨中，NC+NS組中NO的含量最低(9.907±4.141)μmol/L，NC+OS組(20.268±3.949)μmol/L與NC+NS組相比，NO的含量升高(P<0.05)。OC+

4、OS組(47.71±6.169)μmol/L中的含量最高，OC+NS組(33.854±5.252)μmaol/L與OC+OS組相比，NO的含量較減少(P<0.05)。各組中PGE2的變化與NO的變化趨勢相似。NC+NS組(2.488±0.509)ng/L中PGE2的含量最低，NC+OS組(14.792±4.011)ng/L與NC+NS組相比，PGE2的含量升高(P<0.05)。OC+OS組(44.023±4.251)ng/L中PGE2的

5、含量最高，OC+NS組(26.352±4.436)ng/L與OC+OS組相比，PGE2的含量較減少(P<0.05)。同時(shí)，NC+NS組軟骨Ⅱ型膠原和蛋白多糖mRNA的表達(dá)量比NC+OS組高(P<0.05)。OC+NS組軟骨Ⅱ型膠原和蛋白多糖mRNA的表達(dá)量比OC+OS組高(P<0.05)。
　　 2.OC+OS組在不同濃度強(qiáng)力霉素(0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L)的作用下，隨著強(qiáng)力霉素濃度的增

6、加，OC+OS組培養(yǎng)液中NO和PGE2含量有逐漸下降的趨勢，同時(shí)軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原mRNA和蛋白多糖mRNA的表達(dá)均出現(xiàn)表達(dá)增加的趨勢。
　　 [結(jié)論]
　　 1.骨關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞對(duì)軟骨Ⅱ型膠原和蛋白多糖的mRNA的表達(dá)有抑制作用。
　　 2.軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原和蛋白多糖mRNA的下降與NO和PGE2的產(chǎn)生增加有關(guān)。
　　 3.強(qiáng)力霉素能夠降低共培養(yǎng)骨關(guān)節(jié)炎軟骨.滑膜細(xì)胞培養(yǎng)液中PGE2和NO的含量，促進(jìn)軟骨