骨痹合劑對(duì)云雙前肢直立聯(lián)合Hulth法大鼠膝骨性關(guān)節(jié)炎模型CollagenX、Aggrecan作用觀察.pdf

1、目的：建立一種與人類(lèi)膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病過(guò)程相似的去雙前肢直立聯(lián)合Hulth法大鼠膝骨性關(guān)節(jié)炎模型，在此模型成功的基礎(chǔ)上，觀察骨痹合劑對(duì)該模型Collagen X、Aggrecan表達(dá)的影響。
　　 方法：選擇48只10天齡SD幼鼠，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、直立組、直立聯(lián)合假Hulth組、直立聯(lián)合Hulth組（共4組，每組12只）。正常對(duì)照組不做任何處理;其余三組在腹腔麻醉下去除雙前肢，手術(shù)后置于原母鼠飼養(yǎng)籠內(nèi)飼養(yǎng)。直立聯(lián)合假Hul

2、th組在去除雙前肢四個(gè)月后行假Hulth手術(shù);直立聯(lián)合Hulth組在去除雙前肢四個(gè)月后行Hulth手術(shù)。四個(gè)組在第二次手術(shù)后1個(gè)月，腹腔麻醉下處死，取下四組的膝關(guān)節(jié)，通過(guò)固定、脫鈣、脫水、包埋、切片、撈片、烤片，行HE染色、甲苯胺藍(lán)染色、藏紅固綠染色及免疫組化觀察分析。在評(píng)價(jià)模型成功的基礎(chǔ)上，再選擇52只10天齡SD幼鼠，在腹腔麻醉下去除雙前肢，術(shù)后置于原母鼠飼養(yǎng)籠內(nèi)飼養(yǎng)，去除雙前肢后四個(gè)月行Hulth手術(shù)，在Hulth手術(shù)后1個(gè)月時(shí)隨

3、機(jī)分為空白對(duì)照組、骨痹合劑組、氨糖美辛組、生理鹽水組（共4組，每組13只），每組處死3只，評(píng)價(jià)模型，在模型成功的基礎(chǔ)上，骨痹合劑組按0.5ml/100g體重給予骨痹合劑灌胃;氨糖美辛組按2mg/100g體重給予氨糖美辛（溶于同體積的生理鹽水里）灌胃;生理鹽水組按0.5ml/100g體重給予生理鹽水灌胃;空白對(duì)照組不做任何干預(yù)，連續(xù)灌胃給藥4周后，麻醉處死相對(duì)應(yīng)的各組大鼠，取下膝關(guān)節(jié)通過(guò)固定、脫鈣、脫水、包埋、切片、撈片、烤片，行HE染色

4、、甲苯胺藍(lán)染色、藏紅固綠染色及免疫組化觀察分析。
　　 結(jié)果：組織形態(tài)學(xué)觀察正常對(duì)照組HE染色、甲苯胺藍(lán)染色、藏紅固綠染色顯示關(guān)節(jié)軟骨表層光滑、平整，軟骨細(xì)胞分布均勻，排序整齊，各層次清晰。直立組、去雙前肢聯(lián)合假Hulth組、直立聯(lián)合Hulth組顯示關(guān)節(jié)面軟骨表層潰瘍或裂隙，甚至出現(xiàn)局部缺損，軟骨細(xì)胞數(shù)量明顯減少，軟骨層染色不均，局部出現(xiàn)失染現(xiàn)象;關(guān)節(jié)各層軟骨細(xì)胞出現(xiàn)簇集樣生長(zhǎng)，深層可見(jiàn)肥大軟骨細(xì)胞;尤以直立聯(lián)合Hulth組最為

5、明顯。通過(guò)各組藥物干預(yù)，與正常對(duì)照組、生理鹽水組比較，骨痹合劑組、氨糖美辛組的關(guān)節(jié)軟骨表層較光滑、平整，關(guān)節(jié)表面較連續(xù)，軟骨細(xì)胞分布較均勻，排序較整齊，各層次較清晰，無(wú)明顯細(xì)胞簇集現(xiàn)象，潮線較完整，局部染色較均勻。
　　 結(jié)論：成功建立了去雙前肢直立、去雙前肢直立聯(lián)合假Hulth、去雙前肢直立聯(lián)合Hulth三種模型，其中去雙前肢直立聯(lián)合Hulth模型膝關(guān)節(jié)退變更為典型，此模型制作簡(jiǎn)便，可重復(fù)性強(qiáng)，與人類(lèi)直立狀態(tài)膝骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)