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1、目的:探討自大鼠外周血獲取內(nèi)皮前體細(xì)胞(endothelial progenitorcells EPCS)的方法,為干細(xì)胞移植治療缺血性心肌損傷提供新的無創(chuàng)性的細(xì)胞來源。 方法:抽取經(jīng)連續(xù)皮下注射大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(Rat GranulocyteColony Stimulating Factor rG-CSF)七天的成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠外周血,應(yīng)用聚蔗糖(Ficoll 400)密度梯度離心法分離提
2、取大鼠外周血中的單個(gè)核細(xì)胞,然后以20%低糖IMDM、胎牛血清、馬血清、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor bFGF)和血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor VEGF)等混合而成的完全培養(yǎng)液,進(jìn)行體外培養(yǎng)擴(kuò)增,培養(yǎng)所得細(xì)胞經(jīng)CD31、CD34、Flk-1和vW F免疫熒光染色并檢測其結(jié)合UEA-1、攝取ac-LDL的能力。 結(jié)果:
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