兩株黃河三角洲耐鹽真菌次生代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、耐鹽微生物生活和培養(yǎng)的環(huán)境比較特殊,而普通微生物很難生存,在這種環(huán)境中可能具有特殊的生物代謝途徑,從而可以產(chǎn)生獨(dú)特的代謝產(chǎn)物。山東東營黃河三角洲自然保護(hù)土壤嚴(yán)重鹽漬化,許多地方土壤含高鹽度,同時(shí)受到海陸的共同作用,形成了比較獨(dú)特的生態(tài)環(huán)境。這一區(qū)域存在著能產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎活性化合物的耐鹽微生物,值得深入研究。
　　為了研究黃河三角洲來源耐鹽菌株次生代謝產(chǎn)物,我們結(jié)合化學(xué)和活性集成篩選模式,對黃河三角洲鹽堿地土壤中微生物進(jìn)行了研究。主要

2、內(nèi)容為:耐鹽微生物的分離純化;耐鹽真菌的篩選和和發(fā)酵條件優(yōu)化;耐鹽真菌次生代謝產(chǎn)物的分離純化;單體化合物結(jié)構(gòu)鑒定和活性初步評價(jià)。
　　從黃河三角洲泥土樣品、西沙群島海域海綿和珊瑚樣品以及南海深海海水和海泥樣品中分離純化排重后得到耐鹽菌株192株,包括121株真菌,56株放線菌和15株細(xì)菌。并通過化學(xué)和活性相結(jié)合的篩選方法,篩選到兩株耐鹽真菌OUCMDZ-2713和 OUCMDZ-2702,菌株鑒定分別為支孢樣支孢霉菌(Clados

3、porium cladosporioides)和支頂孢屬(Acremonium sp.)真菌,并對其次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步探索研究。
　　通過考察不同培養(yǎng)方式、培養(yǎng)基、酸堿度和鹽度四個(gè)方面對這兩株耐鹽真菌次生代謝產(chǎn)物的影響,確定大發(fā)酵條件。對其次生代謝產(chǎn)物采用減壓和加壓硅膠柱色譜、薄層色譜、凝膠柱色譜和半制備高效液相色譜等多種色譜分離技術(shù)進(jìn)行分離純化,從兩株真菌的發(fā)酵產(chǎn)物中共分離到22個(gè)單體化合物,結(jié)合質(zhì)譜和核磁共振波譜等波譜學(xué)手

4、段鑒定化合物結(jié)構(gòu),最終鑒定17個(gè)化合物結(jié)構(gòu)(1-17)(結(jié)構(gòu)見圖1)。結(jié)構(gòu)類型分別為2個(gè)內(nèi)酰胺類(1、2),7個(gè)二酮哌嗪類(3-9),3個(gè)脂肪酸酯類(13-15),2個(gè)核苷類(10、11),1個(gè)鄰二醇類(12),1個(gè)吡咯甲酰胺(16)以及一個(gè)甾醇化合物(17),其中內(nèi)酰胺類化合物1、2以及脂肪酸酯類化合物13為新化合物。
　　采用紙片法對部分化合物進(jìn)行了抑菌活性初步評價(jià),基本無抑菌作用。采用MTT法和CCK-8法對部分化合物的MC