噻托溴銨抑制瘦素介導(dǎo)的大鼠氣道平滑肌細(xì)胞的增殖.pdf

1、目的：探討噻托溴銨對瘦素促大鼠氣道平滑肌細(xì)胞(ASMCs)增殖作用的影響。
　　方法：體外培養(yǎng)ASMCs(選用第5～6代)；隨機(jī)分為A組(空白對照組)、B組(瘦素100μg/L組)、C組(瘦素100μg/L+噻托溴銨15μg/L組)、D組(瘦素100μg/L+噻托溴銨30μg/L組)、E組(瘦素100μg/L+噻托溴銨60μg/L組)、F組(瘦素100μg/L+噻托溴銨120μg/L組)。各組均干預(yù)24 h后，CCK-8法測定增殖

2、，Western-blot法及實時熒光半定量RT-PCR法分別檢測瘦素受體蛋白含量和mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.瘦素對ASMCs表面瘦素受體表達(dá)的影響與空白對照組比較，100μg/L瘦素作用于ASMCs24 h后，其受體mRNA表達(dá)增加(P<0.05)，蛋白含量由對照組的0.327±0.011升至0.541±0.016(P<0.05)。
　　2.瘦素對ASMCs增殖的影響100μg/L瘦素作用于ASMCs24h后，CCK

3、-8法檢測示其OD值(1.065±0.003)較空白對照組(0.967±0.005)顯著升高(P<0.05)。
　　3.噻托溴銨對瘦素促ASMCs增殖作用的影響15μg/L、30μg/L、60μg/L、120μg/L噻托溴銨分別在已有100μg/L瘦素基礎(chǔ)上加入，干預(yù)24 h后CCK-8法結(jié)果示各組OD值較瘦素組下降且與噻托溴銨濃度相關(guān)(r=-0.875，P<0.01)。
　　4.噻托溴銨對ASMCs瘦素受體表達(dá)的影響噻托溴

4、銨干預(yù)后，瘦素受體mRNA表達(dá)減少(P<0.05)；C、D、E、F組蛋白含量分別回降至：0.514±0.017、0.468±0.025、0.331±0.023、0.313±0.017)(P<0.05)，并與噻托溴銨濃度相關(guān)(r=-0.868，P<0.01)。
　　結(jié)論：瘦素可于體外上調(diào)大鼠ASMCs瘦素受體的表達(dá)，并可促進(jìn)大鼠ASMCs的增殖作用，噻托溴銨可抑制瘦素的促ASMCs增殖作用，其機(jī)制可能與下調(diào)大鼠ASMCs表面的瘦素受