OEA激活PPAR-α和CB2受體減輕TNF-α誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)炎癥因子和黏附分子表達(dá)的研究.pdf

1、背景:動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，As)是由多個(gè)因素造成的開(kāi)始于動(dòng)脈內(nèi)膜的一種疾病，現(xiàn)如今As的發(fā)病率和致死率逐漸升高，并且發(fā)病年齡年輕化。大量的流行病學(xué)調(diào)查和實(shí)驗(yàn)研究證明，高血脂、高血壓、吸煙、糖尿病等都是與As發(fā)生相關(guān)的危險(xiǎn)因素，但關(guān)于As發(fā)生的機(jī)制一直眾說(shuō)紛紜，直到1999年，ROSS等提出“As是一種慢性炎癥性疾病”的觀(guān)點(diǎn)，給As的研究帶來(lái)了一個(gè)全新的方向與思路。本論文的研究就是基于這個(gè)觀(guān)點(diǎn)，從炎癥反應(yīng)的角度去

2、探索一種新的、副作用小的抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物。油酰乙醇胺（N-Oleoylethariolamine，OEA）是大麻素的一種類(lèi)似物，是PPAR-α受體天然的激動(dòng)劑之一，最初主要是研究OEA在調(diào)節(jié)食欲、治療肥胖癥等方面的作用。隨后的研究發(fā)現(xiàn)，OEA能抑制脂多糖誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞的炎癥反應(yīng)。OEA減少ox-LDL誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的壞死，促進(jìn)入臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞上PPAR-α受體mRNA表達(dá)的上調(diào)，還具有抑制小鼠巨噬細(xì)胞（RAW264.7）

3、C-反應(yīng)蛋白、TNF-α的分泌。我們實(shí)驗(yàn)室前期的研究發(fā)現(xiàn)OEA對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)有著較明顯的保護(hù)性效應(yīng)，但是作用機(jī)制目前還不很清楚。故本文的研究目的主要是進(jìn)一步論證OEA的抗內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的作用及闡明其具體機(jī)制。
　　目的:研究OEA對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的保護(hù)性作用及OEA發(fā)揮作用的相關(guān)機(jī)制。
　　方法:原代提取培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，給予不同濃度的OEA預(yù)保護(hù)處理，然后予TNF

4、-α刺激誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)，利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、Real-time RT PCR、Westem blotting等實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)IL-6、IL-8、VCAM-1、ICAM-1等炎癥因子及黏附分子的表達(dá)。在同樣的處理?xiàng)l件下，分別給予PPAR-α和CB2受體阻斷劑，檢測(cè)IL-6、IL-8、VCAM-1、ICAM-1表達(dá)的變化，并進(jìn)一步探討OEA發(fā)揮抗炎及抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的機(jī)制。
　　結(jié)果:OEA呈濃度依賴(lài)性降低TNF-α誘導(dǎo)的HU

5、VECs中IL-6、IL-8、VCAM-1、ICAM-1的表達(dá)，當(dāng)OEA濃度為100μM時(shí)效果最明顯。分別阻斷PPAR-α和CB2受體后，OEA降低IL-6、IL-8、VCAM-1、ICAM-1表達(dá)的效應(yīng)減弱。不同濃度的OEA能激活PPAR-α和CB2受體，降低炎癥信號(hào)通路分子NF-κB P65的表達(dá)，且阻斷PPAR-α和CB2受體后，對(duì)NF-κB P65抑制作用減弱。另外，不同濃度的OEA對(duì)P38 MAPK和p-STAT3等炎癥信號(hào)分