Gax基因抑制血管外膜成纖維細(xì)胞增生的試驗(yàn)研究.pdf

1、眾多研究證明，血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)、血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)、血管外膜成纖維細(xì)胞(AF)、其它的血管壁細(xì)胞和基質(zhì)均參與血管重構(gòu)。既往研究把VEC、VSMC作為重點(diǎn)，近期研究證明血管外膜中的主要細(xì)胞成分AF并非是“靜止、被動(dòng)”的細(xì)胞，而是對(duì)多種刺激具有應(yīng)答能力的“運(yùn)動(dòng)、有活性”的細(xì)胞，被激活后具有增殖遷移、表型轉(zhuǎn)化、粘附凋亡、分泌細(xì)胞因子和合成外基質(zhì)能力。最近發(fā)現(xiàn)血管外膜含有較多的祖細(xì)胞，不論在體內(nèi)或是體外都能夠分化為VSMC。盡管在

2、這方面的研究存在爭(zhēng)議，但越來(lái)越多的證據(jù)說(shuō)明AF在血管增殖性病變具有重要地位。盡管人們?cè)谘苤貥?gòu)過(guò)程中對(duì)AF作用機(jī)制作了大量的研究，取得了一些進(jìn)展，但AF的許多生物學(xué)機(jī)制并不清楚。TGF-βI被認(rèn)為是影響AF生物功能最重要的多功能細(xì)胞因子，但TGF-βI對(duì)于AF具體的作用機(jī)制尚不清楚。 在血管重構(gòu)過(guò)程中，諸如VEGF、FGF等生長(zhǎng)因子、它們的受體以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在血管細(xì)胞增殖中的作用研究較為深入，然而關(guān)于核轉(zhuǎn)錄因子如何將這些信號(hào)

3、整合并啟動(dòng)級(jí)聯(lián)調(diào)節(jié)反應(yīng)研究很少。在轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)節(jié)是眾多細(xì)胞增殖信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的核心，在真核細(xì)胞基因表達(dá)中最重要。Gax基因是近來(lái)發(fā)現(xiàn)的核轉(zhuǎn)錄因子，在心血管系統(tǒng)調(diào)節(jié)個(gè)體發(fā)育、器官形成、細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和遷移中起重要作用。Gax基因是抑止性轉(zhuǎn)錄因子中唯一的同源異形盒基因，在干預(yù)血管平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞增殖方面具有顯著的作用，但Gax基因是否在AF中過(guò)表達(dá)并能調(diào)節(jié)它的增殖尚不清楚，國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)類(lèi)似研究的報(bào)道。 綜上所述，我們提出這樣的的假

4、設(shè)：TGF-βI能夠激活影響AF增殖的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)，而轉(zhuǎn)錄抑制因子Gax基因能夠在體外AF中有效地表達(dá)，并且能夠阻斷上述網(wǎng)絡(luò)內(nèi)信號(hào)通路的連接和交互對(duì)話(cross-talk)，從而整合和調(diào)控AF的生物活性。本研究正是根據(jù)以上思路，設(shè)計(jì)體外試驗(yàn)以驗(yàn)證這一假說(shuō)。 結(jié)論： 1．Gax基因能夠在血管外膜的AF表達(dá)，表達(dá)量呈Ad-Gax劑量和時(shí)間依賴(lài)性。Gax基因?qū)F功能的干預(yù)也呈劑量和時(shí)間依賴(lài)性。 2．TGF-βl對(duì)AF增

5、殖、遷移和粘附功能均有促進(jìn)作用。Gax基因能夠有效地抑SUTGF-βI對(duì)AF增殖、遷移和粘附的促進(jìn)作用。 3．TGF-βl能夠激活CDK4，抑制Pl5，P16和P21，增加AF細(xì)胞周期的S期百分比。Gax基因能夠下調(diào)CDK4和上調(diào)P15、P16和P21 mRNA和蛋白的表達(dá)，增加AF細(xì)胞周期中GO一Gl的百分比并促進(jìn)其凋亡。 4．TGF-βI能夠激活Smad，Integrin-FAK-PYK2，Ras-MEKl-ERK2