重組人巨細(xì)胞病毒pp65蛋白抗病毒效應(yīng)及與中藥“金葉敗毒顆粒”的協(xié)同性研究.pdf

1、該論文采用DNA體外重組技術(shù),構(gòu)建pp62的原核表達(dá)載體,并在E.Coli大腸桿菌表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行SDS-PAGE親和層析后,經(jīng)Western blot鑒定,證實(shí)為較高純度的pp65蛋白;將獲得的pp65蛋白對(duì)人外周血單個(gè)細(xì)胞（PBMC）進(jìn)行刺激,誘導(dǎo)CD8<'+>T細(xì)胞的激活與增殖,用MTT法檢測(cè)其對(duì)受人巨細(xì)胞病毒（HCMV）感染的人胚肺成纖維細(xì)胞（HEL）的殺傷作用,證實(shí)重組pp65蛋白可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性CD8<'+>T細(xì)胞（C

2、TL）反應(yīng),對(duì)HCMV感染的細(xì)胞進(jìn)行有效殺傷;采用RT-PCR半定量檢測(cè)并比較CTL、金葉敗毒顆粒、CTL+金葉敗毒顆粒、更昔洛韋（GCV）對(duì)HCMV晚期mRNA表達(dá)水平的抑制情況,探討它們對(duì)HCMV的抑制作用和CTL與中藥在抗HCMV中的相互關(guān)系,結(jié)果發(fā)現(xiàn)HCMVpp65特異性CTL對(duì)HCMV有抑制作用,與中藥“金葉敗毒顆?！庇休^好的協(xié)同作用;應(yīng)用骨骼染色、病理檢查、染色體檢查和MTT檢測(cè)等方法,觀察中藥“金葉敗毒顆?！睂?duì)孕鼠生殖功能