不同切削深度兔PRK和去瓣EPI-LASIK術(shù)后早期角膜愈合反應的觀察.pdf

1、目的：研究不同切削深度兔準分子激光屈光性角膜切削術(shù)( Photorefractive keratectomy,PRK)和去瓣EPI-LASIK( Epipolis laser in-situ keratomileusis, EPI-LASIK)術(shù)后角膜上皮和基質(zhì)中細胞形態(tài)、炎癥細胞、以及細胞因子堿性成纖維細胞生長因子(Basicity fibroblast growth factor,bFGF)、核轉(zhuǎn)錄因子(Nuclear transc

2、ription factors,NF-κB)的表達,探討兩種手術(shù)方式在不同切削深度時早期角膜愈合反應,為臨床工作提供理論依據(jù)。
　　方法：將所選實驗兔22只隨機分為三個組,高度切削組10只(-10.00D)、低度切削組10只(-3.00D)、剩余2只為空白對照組。建立實驗動物模型,右眼去瓣EPI-LASIK,左眼PRK,高度切削組和低度切削組于術(shù)后1d、3d、5d、7d空氣栓塞法每天隨機處死1只,共8只動物,剩余14只于術(shù)后7d一

3、并處死,沿角膜緣取角膜組織。用熒光染色法每日觀察實驗動物術(shù)后眼部的基本狀況、角膜上皮的愈合情況以及愈合的時間;石蠟切片行HE染色光鏡觀察角膜上皮與基質(zhì)細胞的形態(tài)學變化和炎癥反應情況,并在光鏡下計數(shù)炎癥細胞的數(shù)量;免疫組化方法檢測早期角膜創(chuàng)傷愈合反應時細胞因子bFGF、NF-κB的表達,應用Image Pro Plus5.0圖像分析系統(tǒng)進行定量分析;TUNEL法檢測角膜基質(zhì)細胞的凋亡情況。所有數(shù)據(jù)應用SPSS17.0行統(tǒng)計學分析。

4、　　結(jié)果：1、眼部狀況:PRK眼術(shù)后癥狀明顯,3d時有所減輕,去瓣EPI-LASIK術(shù)后3d時癥狀基本消失,高度切削組較低度組癥狀明顯。2、角膜上皮愈合情況:熒光染色觀察,高度切削組PRK眼角膜上皮愈合時間最短3d,最長6d,平均為4.33d,去瓣EPI-LASIK眼角膜上皮愈合時間最短3d,最長5d,平均為3.83d,低度切削組愈合較快。3、角膜的形態(tài)學改變:在低度切削組,PRK術(shù)后角膜上皮過度增生,細胞排列紊亂,可見大量空泡細胞,基

5、質(zhì)層排列紊亂,炎癥細胞浸潤。去瓣 EPI-LASIK術(shù)后角膜上皮未見明顯增生,細胞和基質(zhì)層排列稍紊亂,未見明顯的空泡細胞和炎癥細胞浸潤。高度切削組形態(tài)學改變明顯。4、炎癥反應:低度切削組,PRK與去瓣EPI-LASIK角膜中炎癥細胞數(shù)量相比,差異無統(tǒng)計學意義(t=2.20,P>0.05)。高度切削組,PRK較去瓣EPI-LASIK角膜中炎癥細胞的數(shù)量明顯增加,差異有統(tǒng)計學意義(t=10.32,P<0.01)。5、角膜基質(zhì)細胞凋亡情況:低

6、度切削組,PRK與去瓣EPI-LASIK相比,凋亡細胞的數(shù)量未見明顯異常(t=2.45,P>0.05),而高度切削組,PRK較去瓣EPI-LASIK凋亡細胞的數(shù)量明顯增加,差異有統(tǒng)計學意義(t=6.03,P<0.01)。6、角膜中bFGF、NF-κB的表達:PRK和去瓣EPI-LASIK術(shù)后角膜中bFGF、NF-κB的表達均較空白對照組增加,低度切削組,PRK與去瓣EPI-LASIK角膜中bFGF、NF-κB表達未見明顯異常(t=2.5