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文檔簡介
1、本研究分為二部分:
第一部分、重組人生長激素對膿毒癥大鼠保護(hù)的作用
目的:構(gòu)建膿毒癥大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,觀察重組人生長激素(rhGH)對膿毒癥大鼠的保護(hù)作用。
方法:SD大鼠75只,隨機(jī)分為3組(每組25只):A組為對照組,僅予以開腹游離盲腸,B組為膿毒癥組,開腹游離盲腸并行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)制造膿毒癥模型,C組為rhGH治療組,行盲腸結(jié)扎穿孔模型的同時(shí)予以皮下注射rhGH1.0U/kg一次,Oh、2h、
2、8h、12h、24h后觀察大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性、TNF-α水平和死亡率,24h后取心臟血行血培養(yǎng)。比較不同時(shí)間點(diǎn)ALT活性、TNF-α表達(dá)、死亡率和24h血培養(yǎng)結(jié)果。
結(jié)果:A組未見大鼠死亡,B組24h存活率48%(12/25)、C組24h存活率76%(19/25)。與A組相比,B、C組大鼠血清中ALT、TNF-α表達(dá)、血培養(yǎng)陽性率明顯增加(P<0.05),而與B組相比,C組大鼠血清中ALT、TNF-α表達(dá)、血
3、培養(yǎng)陽性率明顯降低(P<0.05)。
結(jié)論:
1、成功構(gòu)建盲腸結(jié)扎穿孔的大鼠實(shí)驗(yàn)性膿毒癥模型。
2、重組人生長激素對盲腸結(jié)扎穿孔誘導(dǎo)的大鼠膿毒癥具有明顯的保護(hù)作用。
第二部分、重組人生長激素對膿毒癥大鼠肝臟的影響及作用機(jī)制
目的:觀察重組人生長激素對盲腸結(jié)扎穿孔誘導(dǎo)的膿毒癥大鼠肝臟的影響,并初步探討其作用機(jī)制。
方法:實(shí)驗(yàn)動物分組、膿毒癥模型的構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)
4、動物給藥同第一部分,real-time PCR測定肝組織中TNF-α mRNA和HMGB1 mRNA的表達(dá),Western blot測定肝組織中HMGB1和活化Caspase-3的蛋白表達(dá),免疫組化測定肝組織中NF-κB的表達(dá),原位凋亡檢測TUNEL法檢測肝細(xì)胞的凋亡情況。
結(jié)果:與A組相比,B、C組大鼠肝組織中TNF-α mRNA、HMGB1mRNA、HMGB1和活化Caspase-3表達(dá)增加,NF-κB核移位及肝細(xì)胞凋
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