梔子的指紋圖譜與提取工藝研究.pdf

1、中藥梔子是茜草科植物梔子的干燥成熟果實(shí)，含有環(huán)烯醚萜類（梔子苷類）黃酮類（梔子素?zé)簦?、有機(jī)酸酯類（綠原酸、藏紅花酸類）等化學(xué)成分；具有對(duì)肝臟、腦組織、胰腺細(xì)胞保護(hù)作用，可以促進(jìn)膽汁分泌、調(diào)節(jié)胃機(jī)能、增加內(nèi)臟血流量、修復(fù)骨科軟組織損傷心臟降壓、解熱、抗菌、抗炎等作用，具有廣泛的藥用價(jià)值。 本實(shí)驗(yàn)收集了10批梔子樣品，確定了最佳提取工藝，采用高效液相色譜法，對(duì)藥材和提取物的指紋圖譜及相關(guān)性進(jìn)行了研究，為科學(xué)評(píng)價(jià)藥材和制劑質(zhì)量提供了有

2、意義的探索。 根據(jù)梔子含環(huán)烯醚萜類梔子苷、異梔子苷、京尼平龍膽二糖苷等水溶性成分，采用水、50％甲醇、甲醇作為提取溶劑制備供試品，經(jīng)測(cè)試比較，色譜圖基本無差異，水溶液較難濾過，50％甲醇毒性不大，故采用50％甲醇作為提取溶劑制備供試液，HPLC分析結(jié)果表明，該提取方法重現(xiàn)性良好。參照物選用結(jié)構(gòu)明確的梔子苷，色譜柱選用Kromasil C18柱，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，建立了真實(shí)反映梔子品質(zhì)的HPLC指紋圖譜。所建立的色譜圖，化學(xué)指

3、紋信息完整，色譜峰分離度好，特征明顯。方法的精密度、穩(wěn)定性和重復(fù)性符合指紋圖譜研究的技術(shù)要求，可作為梔子藥材的品質(zhì)評(píng)價(jià)的質(zhì)量控制的科學(xué)依據(jù)。 根據(jù)梔子的性質(zhì)，其提取工藝設(shè)計(jì)為：水提取、醇沉淀、正丁醇提取。影響水提取工藝的主要因素為：加水量、藥材浸泡時(shí)間、煎煮次數(shù)和煎煮時(shí)間，按4因素3水平L9（34）進(jìn)行正交試驗(yàn)，確定梔子最佳提取工藝為梔子藥材加10倍量的水，煎煮2次，每次2小時(shí)。經(jīng)中試放大生產(chǎn)，此工藝設(shè)計(jì)合理，穩(wěn)定可行。影響醇沉

4、淀的主要因素為：浸膏濃度、浸膏溫度、醇沉濃度和靜置時(shí)間，按四因素三水平進(jìn)行正交試驗(yàn)，等到一次醇沉條件為：煎煮液濃縮至每1ml含1．0g生藥，浸膏冷卻至室溫（20～25℃），加乙醇沉淀，使含醇量為75％，靜置12h。經(jīng)中試放大生產(chǎn)，此工藝條件可行。二次醇條件為：一次醇沉液濃縮至每1ml含2．0g生藥，浸膏冷卻至室溫（20～25℃），加乙醇沉淀，使含醇量為85％，靜置12h。經(jīng)中試放大生產(chǎn)，此工藝條件可行。影響正丁醇提取工藝的主要因素為：藥

5、液濃度（含生藥量）、溶媒用量和提取次數(shù)，根據(jù)正交試驗(yàn)得到正丁醇最佳提取工藝條件為：藥液濃縮至相當(dāng)于每1ml含2．0g生藥，用1．5倍量正丁醇提取4次。經(jīng)中試放大生產(chǎn)，此工藝條件可行。 根據(jù)本文設(shè)計(jì)的提取工藝制備的10批提取物，經(jīng)指紋圖譜測(cè)定比較，證明此工藝條件穩(wěn)定可行，重現(xiàn)性好，提取物的指紋圖譜與藥材的指紋圖譜相關(guān)性良好，藥材中主要特征峰均在提取物色譜圖上得到體現(xiàn)。 本文建立的指紋圖譜和提取工藝在實(shí)際大生產(chǎn)中均得到較好應(yīng)