ISS患兒GHR基因外顯子4、6、10單核苷酸多態(tài)性的研究.pdf

1、目的：
　　 特發(fā)性矮?。↖diopathic short stature，ISS）患兒生長激素受體（Growthhormone receptor，GHR）基因單核苷酸多態(tài)性目前是研究的焦點和熱點，本研究目的在于了解ISS患兒GHR基因外顯子4、6、10單核苷酸多態(tài)性（single nucleotidepolymorphism，SNP），及其改變對血清IGF-1和IGF-BP3水平的影響，進一步研究其對生長軸的影響，以明確GHR

2、基因多態(tài)性與ISS的相關(guān)性。
　　 方法：
　　 收集2008年9月至2009年7月蘇州市兒童醫(yī)院就診的青春期前ISS患兒30例，其中男19例，女11例，平均年齡為8.39±2.86歲。且在本院兒?？瞥槿?0名年齡、性別相匹配的正常青春期前兒童（正常對照組）和25名身高介于ISS及正常兒童之間的年齡、性別相匹配的正常青春期前兒童（-1SD組）作為對照組。
　　 （1）化學發(fā)光法測定血清胰島素樣生長因子1（IGF-

3、1）、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3（IGF-BP3）水平，病例組與對照組之間進行組間比較；
　　 （2）采用異丙醇抽提法抽提病例組和對照組基因組DNA，利用聚合酶鏈式反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性（PCR-SSCP）和測序?qū)HR基因的外顯子4、6和10進行突變篩查、確定，以獲得GHR在ISS患兒和對照組中的發(fā)生概率和類型；
　　 （3）比較ISS患兒和對照組兒童GHR外顯子4、6和10的基因多態(tài)性：
　　 （4）組間性別差

4、異應(yīng)用χ2檢驗，年齡及血清IGF-1、IGF-BP3水平比較應(yīng)用t檢驗及秩和檢驗，組間基因型及等位基因頻率比較應(yīng)用χ2檢驗，其基因型及等位基因的相對危險度以優(yōu)勢比（Odds ratio，OR）表示。各基因型間血清IGF-1、IGF-BP3水平差異比較應(yīng)用方差分析。
　　 結(jié)果：
　　 1、病例組與對照組年齡、性別差別無統(tǒng)計學意義（P>0.05）：
　　 2、-1SD組與正常對照組血清IGF-1水平差別無統(tǒng)計學意義

5、（P>0.05）；ISS組與正常對照組、-1SD組與ISS組血清IGF-1水平差別有統(tǒng)計學意義（t檢驗近似P<0.05）：
　　 3、-1SD組與正常對照組血清IGF-BP3水平差異無統(tǒng)計學意義（t檢驗近似P值>0.05），ISS組與正常對照組、ISS組與-1SD組血清IGF-BP3水平差異有統(tǒng)計學意義（t檢驗近似P值<0.0001）；
　　 4、GHR基因外顯子4、6和10多態(tài)性與ISS的關(guān)系本研究在所有研究對象中均未

6、發(fā)現(xiàn)外顯子4有堿基改變；在外顯子6發(fā)現(xiàn)一堿基改變，為119A>G（G168G），該位點SNP基因型頻率的分布在三組之間沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05），其等位基因頻率與對照組相比也無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；在外顯子10發(fā)現(xiàn)一堿基改變，為377G>T（C422F），該位點SNP基因型頻率的分布與正常對照組及-1SD組比較無統(tǒng)計學意義（P>0.05），其等位基因頻率與對照組相比也無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　 5、GHR基因

7、多態(tài)性與血清IGF-1水平
　　 （1）外顯子6119A>G（G168G）位點各基因型（GA、GG）血清IGF-1水平經(jīng)方差分析，示差別沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）；
　　 （2）外顯子10377G>T（C422F）位點各基因型（GT、GG）血清IGF-1水平經(jīng)方差分析，示差別沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）
　　 6、GHR基因多態(tài)性與血清IGF-BP3水平
　　 （1）外顯子6119A>G（G168G

8、）位點各基因型（GA、GG）血清IGF-BP3水平經(jīng)方差分析，示差別沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）；
　　 （2）外顯子10377G>T（C422F）位點各基因型（GT、GG）血清IGF-BP3水平經(jīng)方差分析，示差別沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）
　　 結(jié)論：
　　 1、血清IGF-1水平可以作為青春期前ISS的診斷參考指標。
　　 2、血清IGF-BP3水平可以作為青春期前ISS的診斷參考指標。

9、　　 3、GHR基因外顯子6119位點基因型頻率分布與ISS的發(fā)病無關(guān)。
　　 4、GHR基因外顯子6119位點等位基因頻率的改變不能引起血清IGF-1水平、IGF-BP3水平改變。
　　 5、GHR基因外顯子10377位點基因型頻率分布與ISS的發(fā)病無關(guān)。
　　 6、GHR基因外顯子10377位點等位基因頻率的改變不能引起血清IGF-1水平、IGF-BP3水平改變。
　　 7、需要進一步擴大樣本及設(shè)計