擬組織化培養(yǎng)肝細(xì)胞用作藥物篩選模型的可行性研究.pdf

1、本論文采用肝細(xì)胞的擬組織化凝膠包埋培養(yǎng)方式,主要從藥物代謝和藥物肝毒性兩個(gè)方面來研究其用于藥物篩選的可行性. 本論文首先考察了大鼠肝細(xì)胞凝膠包埋與作為對(duì)照培養(yǎng)模型的單層貼壁細(xì)胞的CYP1A2、CYP2B、CYP3A和Ⅱ相酶中GST的活性.通過比較,發(fā)現(xiàn)凝膠包埋細(xì)胞比單層貼壁培養(yǎng)細(xì)胞能更好地保持各項(xiàng)藥物代謝酶的活性. 其次,本文采用超低溫保存方法來解決肝細(xì)胞無法增殖的實(shí)際問題,通過觀察超低溫凍存后大鼠肝細(xì)胞在兩種培養(yǎng)模型下

2、的CYP1A2、CYP2B、CYP3A和Ⅱ相酶GST酶活表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后仍在凝膠包埋培養(yǎng)中保持比平板貼壁細(xì)胞更好的酶活性. 本文還采用了大鼠肝細(xì)胞凝膠包埋這一培養(yǎng)模型系統(tǒng)研究了藥物他克寧(tacfine,THA)的毒性機(jī)理,并與傳統(tǒng)的單層貼壁培養(yǎng)比較,揭示了他克寧毒性與CYP1A2及GSH關(guān)系方面的新的發(fā)現(xiàn),有助于解決了一些由相互矛盾的文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果所引起的困惑. 最后,為了比較大鼠和人之間的種屬差異,更真實(shí)地